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雞促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

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雞促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用,。
檢測范圍:96T
2ng/L -80ng/L
使用目的:
本試劑盒用于測定雞血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中雞促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH),。用純化的雞促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH),,再與 HRP標(biāo)記的促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)抗體形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP  酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的,。顏色的深淺和樣品中的促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD  值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中雞促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)濃度,。,,
試劑盒組成


雞促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒標(biāo)本要
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,,因   NaN3抑制辣根過(HRP)活性。
操作步驟
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。3.溫育:用封板膜封板后37℃溫育30分鐘,。
4.配液:將 30倍濃30秒后棄去,如此靜重復(fù) 5次,,拍干,。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,30倍稀釋后備用,。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3,。
8.洗滌:操作同 5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色10分鐘,。|
10.終止:每孔加終止液    50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)),。
11.測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

雞促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總:

計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),, OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與  OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,,將樣品的 OD值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實(shí)際濃度,。

雞促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會有析出,稀釋時(shí)可在浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間控制在 5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本  OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第孔的 OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉
6.底物請避光保存。,。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,試驗(yàn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃,。
2.有效期:6個(gè)月
 

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