雞禽流感病毒抗體（AIV Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：96T
使用目的：本試劑盒用于測定雞血清,血漿及相關(guān)液體樣本中禽流感病毒抗體（AIV Ab）表達,。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中雞禽流感病毒抗體（AIV Ab）表達,。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原,，可與樣品中禽流感病毒抗體（AIV Ab）相結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-抗原復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的,。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中雞禽流感病毒抗體（AIV Ab）的存在與否。

試劑盒組成 

雞禽流感病毒抗體（AIV Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
操作步驟
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號,，每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔,、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外。 
7.溫育：操作同3,。
8.洗滌：操作同5,。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)）,。
11.測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

計算和結(jié)果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為禽流感病毒抗體（AIV Ab）陰性
陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為禽流感病毒抗體（AIV Ab）陽性

雞禽流感病毒抗體（AIV Ab）酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1．操作嚴格按照說明書進行,，本試劑不同批號組分不得混用,。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
3．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果,。
4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
5．底物請避光保存,。
6．試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準，使用雙波長檢測時,，參考波長為630nm
7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,，使用時必須注意安全,。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃。
2．有效期：6個月