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羊痘抗體(Pox-Ab)酶聯免疫分析試劑盒

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羊痘抗體(Pox-Ab)酶聯免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用,。
檢測范圍:96T
3.5ng/L - 120ng/L
使用目的:本試劑盒用于測定羊血清、血漿及相關液體樣本中羊痘抗體(Pox-Ab)含量,。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中羊痘抗體(Pox-Ab)水平,。用純化的羊細胞因子(CK)抗原包被微孔板,制成固相抗原,,往包被的微孔中依次加入羊痘抗體(Pox-Ab),,再與HRP標記的細胞因子(CK)抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,,經過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的,。顏色的深淺和樣品中的羊痘抗體(Pox-Ab)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中羊痘抗體(Pox-Ab)濃度,。 

試劑盒組成 

羊痘抗體(Pox-Ab)酶聯免疫分析試劑盒標本要求 
1.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外,。 
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉)。
11.測定:以空白空調零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
羊痘抗體(Pox-Ab)酶聯免疫分析試劑盒操作程序總結:


計算
  以標準物的濃度為橫坐標,,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,,即為樣品的實際濃度,。 
羊痘抗體(Pox-Ab)酶聯免疫分析試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,,板條應裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結果,。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,,推薦使用排槍加樣,。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第yi孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃,。
2.有效期:6個月

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