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人抗神經(jīng)元核抗體1(ANNA-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

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人抗神經(jīng)元核抗體1(ANNA-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:96T 0.8ng/ml -24ng/ml
使用目的:本試劑盒用于測定人血清,、血漿及相關液體樣本中抗神經(jīng)元核抗體1(ANNA-1)含量,。

實驗原理
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人抗神經(jīng)元核抗體1(ANNA-1)水平。用純化的抗原包被微孔板,,制成固相抗原,,往包被的微孔中依次加入ANNA-1,再與HRP標記的抗原結合,,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成終的,。顏色的深淺和樣品中的抗神經(jīng)元核抗體1(ANNA-1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標準曲線計算樣品中人抗神經(jīng)元核抗體1(ANNA-1)濃度,。 
試劑盒組成 

人抗神經(jīng)元核抗體1(ANNA-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒標本要求 
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復5次,,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外,。 
7.溫育:操作同3,。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉),。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。
人抗神經(jīng)元核抗體1(ANNA-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結:


計算
  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,,在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實際濃度,。 
人抗神經(jīng)元核抗體1(ANNA-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,,板條應裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結果,。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔,。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第yi孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存,。
7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃,。
2.有效期:6個月

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