羊亞洲I型口蹄疫抗體（FMD-I）酶聯(lián)免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究                                                                
檢測范圍：96T使用目的：
本試劑盒用于測定羊血清、血漿及相關(guān)液體樣本中亞洲I型口蹄疫抗體（FMD-I）表達,。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中羊亞洲I型口蹄疫抗體（FMD-I）表達,。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原,，可與樣品中亞洲I型口蹄疫抗體（FMD-I）相結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，與CUTOFF值相比較，從而判定標本中羊亞洲I型口蹄疫抗體（FMD-I）的存在與否,。

試劑盒組成 

羊亞洲I型口蹄疫抗體（FMD-I）酶聯(lián)免疫分析試劑盒標本要求 
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
操作步驟
1.編號：將樣品對應微孔按序編號,，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔,、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照50μl,。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復5次,，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外,。 
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5,。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)）,。
11.測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。

計算和結(jié)果判定：
  試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
  臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
  陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為亞洲I型口蹄疫抗體（FMD-I）陰性
  陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為亞洲I型口蹄疫抗體（FMD-I）陽性
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羊亞洲I型口蹄疫抗體（FMD-I）酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1．操作嚴格按照說明書進行,，本試劑不同批號組分不得混用。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存。
3．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。
4．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
5．底物請避光保存。
6．試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,，使用雙波長檢測時,，參考波長為630nm
7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。終止液為2M的硫酸,，使用時必須注意安全。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃,。
2．有效期：6個月