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倉鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)酶聯免疫剖析

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倉鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)酶聯免疫剖析試劑盒運用說明書
本試劑盒僅供研究運用,。
檢測規(guī)模: 96T  0.5U/L - 15U/L
運用意圖:本試劑盒用于測定倉鼠血清、血漿及相關液體樣本中HMG-CoA還原酶(HMGR)的活性,。
實驗原理:本試劑盒運用雙抗體夾心法測定標本中倉鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)水平,。用純化的倉鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次參加HMG-CoA還原酶(HMGR),,再與HRP符號的HMG-CoA還原酶(HMGR)抗體結合,,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗刷后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的效果下轉化成終究的。se彩的深淺和樣品中的HMG-CoA還原酶(HMGR)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,經過規(guī)范曲線核算樣品中倉鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)活性濃度。 
倉鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)酶聯免疫剖析試劑盒運用說明書試劑盒組成 

標本要求 
1.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗。若不能立刻進行實驗,,可將標本放于-20℃保存,,但應防止重復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3按捺辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
操作過程

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)、規(guī)范孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上規(guī)范品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終究稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,悄悄晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   
4.配液:將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗刷:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗刷液,,靜置30秒后棄去,如此重復5次,,拍干,。
6.加酶:每孔參加酶標試劑50μl,空白孔除外,。 
7.溫育:操作同3,。
8.洗刷:操作同5。
9.顯色:每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,,悄悄震動混勻,,37℃避光顯色10分鐘.
10.停止:每孔加停止液50μl,停止反響(此刻藍色立轉),。
11.測定:以空白空調零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加停止液后15分鐘以內進行,。
倉鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)酶聯免疫剖析試劑盒運用說明書操作程序總結:


核算
  以規(guī)范物的濃度為橫坐標,,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出規(guī)范曲線,,依據樣品的OD值由規(guī)范曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋倍數;或用規(guī)范物的濃度與OD值核算出規(guī)范曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,,核算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,,即為樣品的實際濃度,。 
倉鼠HMG-CoA還原酶(HMGR)酶聯免疫剖析試劑盒運用說明書注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標包被板開封后如未用完,,板條應裝入密封袋中保存,。
2.濃洗刷液或許會有結晶分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗刷時不影響成果,。
3.各步加樣均應運用加樣器,并常常校對其準確性,,以防止實驗誤差,。一次加樣時間應當控制在5分鐘內,如標本數量多,,推薦運用排槍加樣,。
4.請每次測定的一起做規(guī)范曲線,做復孔,。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于規(guī)范品孔孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(n倍)后再測定,核算時請終乘以總稀釋倍數(×n×5),。
5.封板膜只限一次性運用,,以防止交叉污染。
6.底物請避光保存,。
7.嚴厲依照說明書的操作進行,,實驗成果斷定有必要以酶標儀讀數為準.
8.一切樣品,,洗刷液和各種廢棄物都應按感染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:,;2-8℃。
2.有效期:6個月

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