大鼠熱休克蛋白Hps-25 

本試劑盒僅供研究使用      標本：血清或者血漿

一,、試 劑 組 成

二、注意事項

1.  此試劑為體外檢測試劑,，效期內(nèi)使用,，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。

2．  使用前應將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘,，

3．  濃縮洗滌液出現(xiàn)結晶后，請于37℃孵育15分鐘,。

4．  濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結晶后,，請于37℃孵育15分鐘

5．  若24小時內(nèi)進行實驗，標本可存放于2～8℃,。不需及時實驗,，標本-20℃保存，避免反復凍融,。

6．  在反復清洗微孔板,，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低度,，造成吸光度偏離的假像,。

7．  加樣完畢后，應注意輕微搖動微孔反應條,，以便使孔中的液體充分混勻,。

8．  試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍,，有效期請見盒內(nèi)標示,。

三、實驗前準備

1．使用前應將盒內(nèi)各試劑取出,，室溫放置至少30分鐘,。

2．準備各種實驗儀器及材料，如微量移液器,，吸頭,，醫(yī)用蒸餾水等

3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液

4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液

5．用應用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中,，充分混勻待用,。）

四、操 作 步 驟

1．取出酶標板,，設空白孔,，依照次序?qū)謩e加入100μl的標準品于空白微孔中（空白孔視為0號標準品，用醫(yī)用蒸餾水替代）

2,、分別標記樣品編號,，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。

3,、將酶標板置于37℃溫育30分鐘,；

4,、將酶標板板取出，將其中的液體甩去,，每個孔中全部加滿應用洗滌液后,，立即甩去液體;

5、每個孔中加滿應用洗滌液后,，輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,，在吸水紙上將酶標板拍干。

6,、重復第5個步驟5次,，在吸水紙上將酶標板拍干。

7,、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。

8,、將96孔板置于37℃溫育30分鐘,。

9、將酶標板取出,，將其中的液體甩去,，每個孔中全部加滿應用洗滌液后，立即甩去液體,。

10,、每個孔中再次加滿洗滌應用液后，室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,，在吸水紙上將酶標板拍干,。

11、重復第5個步驟5次,，在吸水紙上將酶標板拍干,。

12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl,。輕輕振蕩混勻,。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）

13,、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘,。

14、每個微孔中加入50μl的終止液,，輕輕振蕩混勻,。

15、在酶標儀上,，450nm處測定OD; 顯色后,，15分鐘內(nèi)進行測定,。

16、根據(jù)制備的標準曲線,，計算樣本含量

五,、結 果 判 斷

1. 儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值；

2,、檢測值范圍：0－8.0ng/ml

3,、敏感度：0.05ng/ml