目的：本試劑盒用于檢測猴血清，血漿及相關液體樣本中狂犬病毒(RV)水平,。
猴狂犬病毒(RV)ELISA試劑盒實驗原理：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）測定標本中猴狂犬病毒(RV),。用純化的猴狂犬病毒(RV)抗體包被微孔板，制成固相抗體,，可與樣品中狂犬病毒(RV)相結合,，經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的狂犬病毒(RV)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，與CUTOFF值相比較，從而判定標本中猴狂犬病毒(RV)的存在與否,。
猴狂犬病毒(RV)ELISA試劑盒樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清,，保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應該再次
離心。
3. 尿液：用無菌管收集,，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心,。胸腹水、腦脊液參照實行,。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心,。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量,。加入一定量的PBS,，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行,，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
猴狂犬病毒(RV)ELISA試劑盒操作步驟：
1.編號：將樣品對應微孔按序編號,，每板應設陰性對照2孔,、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl,。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復5次，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。 
7.溫育：操作同3,。
8.洗滌：操作同5,。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉）,。
11.測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。
猴狂犬病毒(RV)ELISA試劑盒結果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為狂犬病毒(RV)陰性
陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為狂犬病毒(RV)陽性