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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>ELISA試劑盒測(cè)定方式我有辦法
ELISA已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題,,是一種特殊的試劑分析方法,,是在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù),。ELISA試劑盒該法由種類(lèi)和變化可分為雙抗體夾心法、間接法,、競(jìng)爭(zhēng)法,、雙位點(diǎn)一步法、捕獲法測(cè)IgM抗體,、應(yīng)用親和素和生物素的ELISA,,今天我們就來(lái)看看ELISA試劑盒測(cè)定方式總結(jié),。
一,、定量測(cè)定
ELISA操作步驟復(fù)雜,,影響反應(yīng)因素較多,,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的一致,因此在定量測(cè)定中,,每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA試劑盒,,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,,曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙,,以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo),,以吸光度為縱坐標(biāo),,將各濃度的值逐點(diǎn)連接,,所得曲線一般呈S形,其頭,、尾部曲線趨于平坦,,中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域,。
二,、定性測(cè)定
定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出"有"或"無(wú)"的簡(jiǎn)單回答,分別用"陽(yáng)性",、"陰性"表示,。"陽(yáng)性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無(wú)反應(yīng),。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,,即用滴度來(lái)表示反應(yīng)的強(qiáng)度,,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。ELISA試劑盒在這種半定量測(cè)定中,,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),,呈陽(yáng)性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度,。根據(jù)滴度的高低,,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,,這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽(yáng)性,、弱陽(yáng)性更具定量意義,。
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