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有關血清使用中的常見問題
1.保存血清的辦法,?
我們建議血清應保存在-5℃至-20℃,。若你一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,,再放回冷凍,。
2.如何解凍血清才不會使產品質量受損?
我們建議您將血清從冷凍箱中取出后,,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。
3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理,?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因,,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的;而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量,。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管中,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾,。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜,。
4.何謂熱滅活,?有必要做熱滅活嗎?
一般以56℃,,30分鐘來處理已解凍的血清,,因為此加熱步驟,可以使補體去活性,,而補體所參與的反應有:溶細胞活性,,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,,增強吞噬作用,,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活,。
實驗顯示,,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的,。經過處理的血清對細胞生長只有微小的促進,,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,,而造成細胞生長速率的降低,。
而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,使研究者認為是微生物的分裂擴增,。
因此建議若非必須,,可以不需要做熱滅活這一步,。如此以來更確保血清的質量。
5.如何避免沉淀物的出現(xiàn),?
建議在使用血清的時候,,注意正確的血清解凍步驟,,并盡量避免滅活血清及長時間的將血清置于高溫環(huán)境中,。
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