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細胞培養(yǎng)板的選擇

時間:2010/7/20閱讀:3539
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細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6,、12,、24、48,、96,、384、1536 孔等,;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型,、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗?zāi)康亩ā?br />

(1)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇

    不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途,。培養(yǎng)細胞,通常是選用平底的,,這樣便于鏡下觀測,、有明確的底面積、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致,。因此做MTT等實驗時,,無論是貼壁和懸浮細胞,一般選用平底板,。測吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板,。要特別注意材質(zhì), 標示“Tissue Culture (TC) Treated”是養(yǎng)細胞用的,。

    U型或V型板,,一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學方面,,當做兩種不同淋巴細胞混合培養(yǎng)時,,需要二者相互接觸刺激,這時一般會選用U型板,因為細胞會由于重力的作用而聚集在很小的范圍內(nèi)內(nèi),。圓底培養(yǎng)板還會用于同位素摻入的實驗,,需要用細胞收集儀收集細胞的培養(yǎng),如“混合淋巴細胞培養(yǎng)”等,。V型板常用做細胞殺傷,、免疫學血凝集實驗。細胞殺傷這種實驗也可用U型板替代(加入細胞后,,低速離心),。

 

(2)Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板的區(qū)別

    Terasaki plate主要是用于晶體學研究,產(chǎn)品設(shè)計便于對晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析,。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,,兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同。材料上選擇crystal class polymer ,,特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu),。

    細胞培養(yǎng)板主要是PS材料,材料是treated sufface,,便于細胞貼壁生長與伸展,。當然還有浮游細胞的生長材料,同時還有l(wèi)ow binding surface

 

(3)細胞培養(yǎng)板與酶標板的區(qū)別

    酶標板一般要比細胞培養(yǎng)板貴,,細胞板主要做細胞培養(yǎng),,也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應(yīng)板,,一般不用做細胞培養(yǎng),,它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測,需要更高的要求和特定的酶標工作液,。

 

(4)常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量

    不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,,一般在2~3mm范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量(參考下表),。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握,。

常用的培養(yǎng)器皿

培養(yǎng)器皿

底面積(cm2

加培養(yǎng)液量(mL)

可獲細胞量

96孔培養(yǎng)板

0.32

0.1

105

24孔培養(yǎng)板

2

1.0

5×105

12孔培養(yǎng)板

4.5

2.0

106

6孔培養(yǎng)板

9.6

2.5

2.5×106

4孔培養(yǎng)板

28

5.0

7×106

3.5cm培養(yǎng)皿

8

3.0

2.0×106

6cm培養(yǎng)皿

21

5.0

5.2×106

9cm培養(yǎng)皿

49

10.0

12.2×106

10cm培養(yǎng)皿

55

10.0

13.7×106

25cm塑料培養(yǎng)瓶

25

5.0

5×106

75cm塑料培養(yǎng)瓶

75

15~30

2×107

25cm玻璃培養(yǎng)瓶

19

4.0

3×106

100cm玻璃培養(yǎng)瓶

37.5

10.0

6×106

250cm玻璃培養(yǎng)瓶

78

15.0

2×107

2500cm旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶

700

100~250

2.5×108

 

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