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二氧化碳培養(yǎng)箱無污染控制技術(shù)

時(shí)間:2010/6/24閱讀:1638
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 二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如穩(wěn)定的溫度(37°C),、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4),、較高的相對濕度(95%),,來對細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。 廣泛應(yīng)用于細(xì)胞,、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),,常見于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研究、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的收集,、各種物理,、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn),、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體,、體外授精(IVF)、干細(xì)胞,、組織工程,、藥物篩選等研究領(lǐng)域。 
      在生物活體內(nèi),,生物體有自身的免疫系統(tǒng)保護(hù)細(xì)胞或組織,,但是在體外培養(yǎng)時(shí),沒有任何保護(hù)自己的免疫屏障,。對于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數(shù)溫度,、CO2 和濕度,大多數(shù)培養(yǎng)箱都能滿足研究實(shí)驗(yàn)的需要,。然而,,針對培養(yǎng)過程中面臨的各種污染源,各品牌二氧培養(yǎng)箱的控制方式和效果不盡相同,因此細(xì)胞體外培養(yǎng)中zui大的威脅實(shí)際上是污染問題,。 
     二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源:細(xì)菌,、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒,、支原體,、非同種細(xì)胞。 
     對于細(xì)胞來說,,非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,,培養(yǎng)箱本身是不會辨別的,而細(xì)胞培養(yǎng)中大部分時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),,因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵,! 
     細(xì)菌:細(xì)菌污染后,培養(yǎng)基1-2天就會變色,,對細(xì)胞生長影響明顯,,應(yīng)迅速將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離,滅菌后丟棄,,還要用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,。 
      病毒:由于病毒寄生生存,爆發(fā)后盡快和正常細(xì)胞隔離,,丟棄處理,,相對來說容易處理,對操作者威脅較大,;盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),,但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此,,潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗,、干擾素等生物制品制作中的難題。
     真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長的比較慢,,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了,;目前沒有好的抑制方法,,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,一旦污染容易反復(fù)爆發(fā),,尤其孢子很難殺滅,。 
     支原體:支原體污染后,因?yàn)樗鼈儾粫辜?xì)胞死亡可以與細(xì)胞長期共存,,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,,細(xì)胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,,實(shí)則細(xì)胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,,如引起細(xì)胞變形,,影響DNA合成,抑制細(xì)胞生長等,,往往被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)者忽視,。 
    非同種細(xì)胞:即細(xì)胞交叉污染,由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒有嚴(yán)格分開,,往往會使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染,。目前,世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染,,致使許多實(shí)驗(yàn)宣告無效,。
因此,以上污染一旦發(fā)生,,細(xì)胞zui后基本只能丟棄,,實(shí)驗(yàn)無法挽救,對于許多取樣困難的實(shí)驗(yàn)損失無法估量,! 

    目前,,二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術(shù)主要有干熱、濕熱,、紫外燈照射,、消毒劑擦拭等。 
    高溫干熱空氣滅菌是目前*的zui有效的滅菌技術(shù),,能*消滅所有微生物污染源(包括耐高溫的芽孢桿菌),;濕熱滅菌通常用于高壓蒸汽滅菌中,比較少用在CO2培養(yǎng)箱上,,濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法,,煮沸的水溫一般至少需為100℃,細(xì)菌繁殖體煮沸5分鐘被殺死,,但芽胞常需煮沸2小時(shí)以上才可被殺死,;紫外燈照射法的有效性受很多因素影響,如遮擋,、時(shí)間,、強(qiáng)度、照射距離,,濕度等,,滅菌效果很難保證;消毒劑擦拭法是對表面滅菌的方法,,適合于平整的表面如實(shí)驗(yàn)臺面,,而箱體內(nèi)部設(shè)計(jì)的死角、各種器件因無法擦拭等因素導(dǎo)致滅菌效果也很有限,而且含氯,、碘的消毒劑對于不銹鋼有腐蝕作用,,不能對不銹鋼箱體進(jìn)行擦拭滅菌。 
 
      英國LEEC TOUCH 190S CO2培養(yǎng)箱是高品質(zhì)培養(yǎng)箱的代表之作,,其中在無污染控制方面,,它采用高達(dá)200℃的高溫干熱空氣滅菌技術(shù),而且整個(gè)滅菌過程僅需7個(gè)小時(shí),,相比較其它品牌的多達(dá)十幾個(gè)小時(shí)的滅菌過程,,LEEC在保證*消滅所有微生物污染源的同時(shí),也為客戶節(jié)省大量寶貴的實(shí)驗(yàn)時(shí)間,,越來越受到客戶的青睞,。 
       在箱體的設(shè)計(jì)上,英國LEEC TOUCH190S CO2培養(yǎng)箱也從多方面進(jìn)行了抑菌設(shè)計(jì):(1)外體采用不銹鋼材質(zhì),,外加抗菌涂層,;(2)內(nèi)壁采用拋光不銹鋼材質(zhì),研究顯示拋光不銹鋼能夠明顯降低污染物的生長,; (3)單片成型內(nèi)腔,,無焊接,沒有縫隙,,*,;(4)HEPA空氣過濾器設(shè)計(jì),能夠有效的過濾掉進(jìn)氣潛在的污染源和顆粒雜質(zhì),;(5)無風(fēng)扇循環(huán),,空氣只靠自然對流運(yùn)動(dòng),沒有裝配通風(fēng)管道等不易拆除不易清潔的零部件,,使清潔工作更為簡便,,消除了導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)交叉污染的一大源頭。
 
      因此,,英國LEEC TOUCH 190S CO2培養(yǎng)箱不但能為細(xì)胞生長提供的體外模擬環(huán)境,,更讓您的細(xì)胞培養(yǎng)全程安全無憂,是細(xì)胞培養(yǎng)箱的未來發(fā)展方向,!  

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