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中級(jí)會(huì)員 | 第18年

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大鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

時(shí)間:2014/6/3閱讀:1126
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大鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒    Rat Osteoprotegerin,OPG ELISA Kit    ,規(guī)格:96T/48T,,產(chǎn)品別名:    大鼠骨保護(hù)素(OPG)檢測(cè)試劑盒                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                
大鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒原理的簡(jiǎn)要說(shuō)明書:骨保素(OPG)是一種分泌型糖蛋白,屬于TNF受體超家族成員,具有TNF受體超家族特征性的N端富含半胱氨酸區(qū)域,,其分子結(jié)構(gòu)與TNFR-2及CD40尤其相似,但它不含跨膜疏水區(qū),,小鼠OPG與人,、大鼠的同源性分別為85%和95%,提示OPG基因在進(jìn)化中的高度保守,。OPG分子由401個(gè)氨基酸組成,,N端21個(gè)氨基酸為信號(hào)肽,經(jīng)糖基化后,,成熟的OPG分子包含380個(gè)氨基酸,,在胞內(nèi)先形成55 ku的單體,隨后兩條肽鏈間的Cys400形成二硫鍵,,以110 ku的同源二聚體形式分泌至胞外,,每條OPG多肽鏈包含23個(gè)半胱氨酸,,可形成9對(duì)二硫鍵,整個(gè)蛋白質(zhì)分為7個(gè)結(jié)構(gòu)域,,并形成3個(gè)功能區(qū):TNF受體結(jié)構(gòu)區(qū),,包括結(jié)構(gòu)域1~4,尤其是Cys185之前部分,,是OPG主要的功能區(qū)域,,執(zhí)行抑制破骨細(xì)胞的功能;死亡域同源區(qū)5和6,,與Fas蛋白跨膜區(qū)形成融合蛋白后具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性,,可以引起細(xì)胞凋亡;肝素結(jié)合結(jié)構(gòu)區(qū),,其作用尚不明確,。      
大鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時(shí)。
4.甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
5.每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
7.每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照。
8.取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    ACTH ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    ACTH ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
兔子促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    ACTH ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    iNOS ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    iNOS ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    iNOS ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
兔誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    iNOS ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
人抑制素B(INH-B)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    INH-B ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
小鼠抑制素B(INH-B)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    INH-B ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
大鼠抑制素B(INH-B)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    INH-B ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
人促甲狀腺素釋放激素(TRH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    TRH ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    TRH ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
豬促甲狀腺素釋放激素(TRH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    TRH ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
大鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    TRH ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
人凝血因子Ⅸ(FⅨ)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    FⅨ ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    FⅨ ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
大鼠凝血因子IX(FIX)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    FIX ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
人凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    Ⅷ-Ag ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    FⅧ-Ag ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
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人脂蛋白α(Lp-α)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    Lp-α ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
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豬脂蛋白α(Lp-α)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Lp-α ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
大鼠脂蛋白α(Lp-α)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    Lp-α ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
兔脂蛋白α(Lp-α)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    Lp-α ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
魚類促性腺激素釋放激素(GnRH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    GnRH ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
人促性腺激素釋放激素(GnRH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    GnRH ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    GnRH ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
大鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    GnRH ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
人甲狀腺素抗體(TAb)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    TAb ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠甲狀腺素抗體(TAb)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    TAb ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
大鼠甲狀腺素抗體(TAb)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    TAb ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    GP-BB ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    GP-BB ELISA Kit    ,,規(guī)格:    48T/96T
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雞催乳素(PRL)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,,英文名:    PRL ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T

                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                     

 

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