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大鼠ELISA試劑盒試驗原理:
Co III試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知Co III濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測,。先將Co III和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后,加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A,、B,,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中Co III的濃度呈比例關系,。
大鼠ELISA試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標準品:800ng/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進行稀稀
空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
標準品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
生物素標記的抗Co III抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進行稀釋
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
標本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型
自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul,、10ul,、50ul、100ul,、200ul,、500ul、1000ul,。
振蕩器及磁力攪拌器等,。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
大鼠ELISA試劑盒操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,,使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
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