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上海研域網(wǎng)絡有限公司專業(yè)供應各種屬ELISA試劑盒,金標試劑盒,細胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清,,提供免費代測服務,,保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質量100%保證,,若存在質量問題,,我們無條件包退換。
人神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白ELISA檢測試劑盒
試驗原理:
GFAP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知GFAP濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測,。先將GFAP和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,,加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,,然后加入底物A,、B,和酶結合物同時作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中GFAP的濃度呈比例關系。
自備材料
蒸餾水,。
加樣器:5ul、10ul,、50ul,、100ul、200ul,、500ul,、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等,。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A,、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗,。
實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
人神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白ELISA檢測試劑盒
操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存,。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質,。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質前使用,。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
底物A應揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值,。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
按照說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。
人神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白ELISA檢測試劑盒
樣品收集,、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內毒素的試管,。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,,避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
人神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白ELISA檢測試劑盒
操作步驟
使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔,。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內,。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內,。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時,。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
甩去孔內液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A,、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,。避免光照,。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應立即測定結果,。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的,,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果,。
人神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白ELISA檢測試劑盒
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990,。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內,、板間變異系數(shù)均小于10%,。
結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標(Y),,相應的GFAP標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,,樣品的GFAP含量可根據(jù)其OD值由標準曲線算出相應的濃度,。
3、檢測值范圍:0-800pg/ml
4,、敏感度: 1.0 pg/ml
Patched/PTCH (Patched protein homolog 1) Hh信號轉導途徑膜蛋白受體抗體 0.2ml
Goat anti-mouse IgG/FITC 熒光素標記羊抗小鼠IgG 0.3ml
Goat anti-mouse IgM/FITC 熒光素標記羊抗小鼠IgM 0.3ml
Goat anti-Rabbit IgG/FITC 熒光素標記羊抗兔IgG 0.3ml
Goat anti-Rb IgM/FITC 熒光素標記羊抗兔IgM 0.3ml
CD63/MLA1 抗黑色素瘤相關抗原(溶酶體膜糖蛋白)抗體 0.2ml
CD66a/CEACAM1 癌胚抗原相關細胞粘附分子1抗體 0.2ml
PTEN/MMAC1(NT) 一種腫瘤抑制基因(N端) 0.2ml
若需要了解試劑盒的詳細信息,,詳情請:謝明:
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