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現(xiàn)貨人N末端前腦鈉肽ELISA檢測試劑盒的試驗方法

時間:2012/11/28閱讀:1130
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上海研域網(wǎng)絡(luò)有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬ELISA試劑盒,金標試劑盒,細胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清,提供免費代測服務(wù),保證實驗結(jié)果客觀真實性,。

人N末端前腦鈉肽ELISA檢測試劑盒

試驗原理:
    NT-proBNP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知NT-proBNP濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將NT-proBNP和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后,,加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A、B,,和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NT-proBNP的濃度呈比例關(guān)系,。

自備材料
蒸餾水,。
加樣器:5ul、10ul,、50ul,、100ul、200,、500ul,、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等,。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A,、B。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗,。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品,。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

人N末端前腦鈉肽ELISA檢測試劑盒

操作注意事項
試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,,不可保存。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水,。
底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
按照說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。

人N末端前腦鈉肽ELISA檢測試劑盒

操作步驟
使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時,。
甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照。
取出酶標板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值,。

局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品,。稀釋度的線性,。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng),。
3. 重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于10%。

人N末端前腦鈉肽ELISA檢測試劑盒

結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1,、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的NT-proBNP標準品濃度為橫坐標(X),,做得相應(yīng)的曲線,,樣品的NT-proBNP含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3,、檢測值范圍:0-800pg/ml
4,、敏感度: 1.0 pg/mlCholinesterase, Butyryl 膽堿酯酶 / 500U
Chondroitin sulfate sodium salt 硫酸軟骨素 [9007-28-7] 25g
Chorionic gonadotropin human 絨毛膜促性腺激素 [9002-61-3] 1mg
Chromium granular 鉻粒 [7440-47-3] 100g
Chromium(III) chloride 氯化鉻 [10025-73-7] 250g
Chromium(III) chloride, hexahydrate 氯化鉻六水 [10060-12-5] 250g
Chromic acid三氧化鉻 [1333-82-0] 250g
Chromium(VI) oxide 三氧化二鉻 [1308-38-9] 250g
Chromium(III) potassium sulfate, dodecahydrate 硫酸鉀鉻十二水 [7788-99-0] 250g
Chromium(III) sulfate, hydrate 硫酸鉻 [10101-53-8] 250g
 

若需要了解試劑盒的詳細信息,詳情:謝明: 

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