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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>上海研域生物分析ATCC細(xì)胞培養(yǎng)篩選的方法
這個(gè)早春的四月,盡管感覺還有一絲的寒意,,但春已不覺間擠進(jìn)了季節(jié)的門檻,,帶著些許的微溫,漾開了人們的臉上的一絲笑意,。
ATCC細(xì)胞是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。ATCC細(xì)胞的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在,。國(guó)內(nèi)資深的ATCC細(xì)胞是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或ATCC細(xì)胞中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞,。
下面紀(jì)寧技術(shù)員就為您分享ATCC細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的幾大要點(diǎn),趕緊拿起小本本記好了,!
一,、取材
ATCC細(xì)胞培養(yǎng)的材料主要來源于外科手術(shù)或活檢瘤組織,取材時(shí)避免用壞死組織,,要挑選瘤細(xì)胞集中和活力較好的部位,,瘤性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是較好的培養(yǎng)材料。取材后盡快培養(yǎng),,因故不能立即培養(yǎng)者,,可凍存,。ATCC細(xì)胞的培養(yǎng)方法及凍存方法同前述正常組織。
二,、成纖維細(xì)胞排除
在ATCC細(xì)胞培養(yǎng)中?;祀s有一些成纖維細(xì)胞,培養(yǎng)時(shí)能與瘤細(xì)胞同時(shí)生長(zhǎng),,并常壓過癌細(xì)胞,,導(dǎo)致癌細(xì)胞生長(zhǎng)受阻以至消失,應(yīng)仔細(xì)排除,。排除方法常有:機(jī)械刮除法,、反復(fù)貼壁法、消化排除法,、膠原酶消化法等,。
三、提高細(xì)胞培養(yǎng)存活率和生長(zhǎng)率
根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),,ATCC細(xì)胞要經(jīng)過對(duì)新環(huán)境的適應(yīng)才能生長(zhǎng),,因此不能局限于一般培養(yǎng)法,須采用一些特殊措施,。如:用適宜底物,,鼠尾膠原底層及飼細(xì)胞底層等。用細(xì)胞生長(zhǎng)因子,,根據(jù)細(xì)胞種類不同選用不同的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子,,如胰島素,雌激素等,。也可以考慮動(dòng)物媒介培養(yǎng),。
總之,在ATCC細(xì)胞待轉(zhuǎn)化細(xì)胞數(shù)量明顯上升,,并出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)塊后,,可轉(zhuǎn)入細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,加培養(yǎng)基,,常溫培養(yǎng)半個(gè)月,,一般每隔一周觀察一次,決定是否換液,、傳代,,靠譜的ATCC細(xì)胞的每個(gè)步驟都至關(guān)重要。細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)一定數(shù)量后凍存,,凍存前應(yīng)進(jìn)行核型分析和存檔,。另外,上海研域生物專注科研試劑盒的研發(fā)及銷售多年,涉及分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué),、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,,滿足您實(shí)驗(yàn)所需,,以實(shí)現(xiàn)與客戶的雙贏,完善的庫存及供應(yīng)體系以及穩(wěn)定的專業(yè)技術(shù),,保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng),。歡迎您前來咨詢與選購。
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