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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
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上海研域生物操作常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

時(shí)間:2024/11/8閱讀:625
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上海研域生物用質(zhì)保價(jià)優(yōu)的產(chǎn)品回饋每一位客戶,,常見細(xì)胞品質(zhì)完善同時(shí)做好售后服務(wù),,如果您購買我們的產(chǎn)品出現(xiàn)了問題,,都將會(huì)一一的為您解決問題,。科研試劑在實(shí)驗(yàn)室中的選擇尤為重要,,大家始終都是希望能夠優(yōu)化地實(shí)現(xiàn)其實(shí)驗(yàn)效果,。因此,我公司非常重視“誠信"建設(shè),,輔佐大家完成漂亮的實(shí)驗(yàn),。


細(xì)胞系(cell line)指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞,。(由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系(FiniteCellLine),、無限細(xì)胞系(InfiniteCellLine)),因此,,細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞(特定環(huán)境下口語和書面語都使用),,廣義是指可傳代的細(xì)胞。

細(xì)胞傳代:

a,、棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。

b,、加1mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min(視細(xì)胞情況而定),,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,,1000rpm離心5min,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

c,、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,;a,、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,,裝入無菌離心管中,1000rpm條件下離心4min,,棄去上清液,,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,,注意凍存管做好標(biāo)識,。將凍存管放入-80℃冰箱,24h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

復(fù)蘇細(xì)胞:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000rpm條件下離心3min,,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,,加入約8mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。


上海研域生物一直處在生物科技產(chǎn)業(yè),常見細(xì)胞生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量有保證,,含量高,,能夠給實(shí)驗(yàn)帶來準(zhǔn)確的結(jié)果。同時(shí)試劑隨貨附帶質(zhì)檢報(bào)告和圖譜,,能為用戶更好的解決各種疑難問題,。


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