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八月的陽光,透過樹葉的縫隙,灑下斑駁的光影,,讓人陶醉在這片詩意中。大鼠ELISA試劑盒變質(zhì)是實(shí)驗(yàn)中比較常見的問題,,那么,,影響大鼠ELISA試劑盒變質(zhì)的幾個(gè)原因,現(xiàn)為大家詳細(xì)總結(jié)下,。
1,、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量一致,即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測結(jié)果也存在差異,,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,,并保證保存條件。 嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性,;對于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,,每次使用則取分裝部分即可,,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
2,、樣本因素
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,,前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體,、異嗜性抗體,、自身抗體、等,,后者包括標(biāo)本溶血,、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長,、標(biāo)本凝固不全,、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。
3,、操作因素
ELISA操作步驟復(fù)雜,,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣,、溫育,、洗滌、顯色,、比色。
4,、方法學(xué)的影響
ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法,、間接法、雙抗原夾心法,、IgM抗體捕捉法,、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的bu公平競爭等因素的影響,,結(jié)果重復(fù)性較差,,質(zhì)量較難控制。
5,、灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下,,ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽性"和“陰性"來報(bào)告結(jié)果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值"(cut-off value,,CO值),,這是定性免疫測定結(jié)果報(bào)告的依據(jù)。
6、標(biāo)本復(fù)查
ELISA手工檢測過程復(fù)雜,,影響因素較多,,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,,因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法,,比如對HBsAg、HBeAg,、HCV-Ab,、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑,、弱陽性標(biāo)本及少見模式的檢測結(jié)果進(jìn)行復(fù)查,。
7、常表示結(jié)果的常用方法
⑴.定性測定,。
⑵.半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示,。
⑶.定量測定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,,結(jié)果以量或單位表示,。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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