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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>上海研域生物提高ELISA試劑盒實驗精確性的方法技術(shù)
在ELISA試劑盒操作中,我們都認為elisa實驗的原理似乎很簡單,不外乎固定抗原,,添加一抗、二抗和底物,,間中夾雜著洗滌和封閉,。然而,即使是平淡無奇的洗滌和封閉,,如果做得不太好,,也有可能毀了整個實驗,在實驗結(jié)束時,,我們是否能獲得有意義的信息,,
這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比,背景噪音會影響您對結(jié)果的判斷,!免疫檢測法的精確性表現(xiàn)為單次實驗孔間(批內(nèi))的重復(fù)性和多次實驗之間(批間)的重復(fù)性,。CV值高則表明精確度低,通常由以下兩個原因造成:移液技術(shù)和洗滌技術(shù),。
一,、移液技術(shù)
1. 移液時,槍頭應(yīng)對準孔,,避免接觸孔壁及底部,。
2. 移液后輕輕晃動混勻試劑,。
3. 如果您的樣品具有黏性,請預(yù)先潤洗槍頭以消除表面張力的影響,。吸液時等待片刻使體積平衡后再取出,。
4. 移液不充分或移液體積不均,說明移液器需要校正,。必要時請檢查移液器并重新校正,。
5. 加樣時,不同的試劑標準品和樣本間都要確保更換槍頭,,避免交叉污染,。
6. 確保使用合適的槍頭。不合適的槍頭無法正確量取吸液和加樣的體積,。
二,、洗滌技術(shù)
1. 如果使用自動洗板機或多通道移液器,請確保進出口能正常運作,。
2. 一次洗滌后,,翻轉(zhuǎn)酶標板倒出多余的洗滌液,并在吸水紙上拍干液體,。洗板太快或太慢都會降低精確度,。不能讓孔內(nèi)液體自然風(fēng)干,需立即進行下一步操作,。
3. 按照說明書,,添加足量的洗滌液至孔內(nèi),并保證洗滌*,。
4. 由于洗滌液不是通用的,,當(dāng)試劑盒內(nèi)的洗滌液用完時,請不要使用其他試劑盒中的洗滌液,。如有需要,,可聯(lián)系技術(shù)支持尋求幫助。
5. 不要減少洗滌時的浸泡時間或跳過浸泡的步驟,。
6. 按照說明書上的洗滌次數(shù)清洗,,隨意改變洗滌的次數(shù)會影響實驗的精確性。
三,、貯液瓶
為避免污染,,不同的試劑使用不同的貯液瓶。一些試劑或樣本很容易被污染(比如唾液,、氧化劑等),,請參考說明書操作。必要時候采取一些預(yù)防措施保護溶液,。
四,、封板覆膜
使用過的封板覆膜可能含有上一步實驗殘留的試劑,,如果重復(fù)使用會造成孔板污染,從而導(dǎo)致精確性低,。建議每一次孵育使用新的封板覆膜。
上海研域生物是一款穩(wěn)定性強,、易保存,,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀的ELISA試劑盒,。我司還 提供上萬種試劑產(chǎn)品,、,標準品、培養(yǎng)基,、實驗室耗材,、抗體等、擁有人,、大鼠,、 小鼠、豚鼠,、牛,、豬、雞,、鴨等多種種屬,,方便您的購買。
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