細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群,。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在,。國(guó)內(nèi)*的細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞,。

下面上海研域生物技術(shù)員就為您分享細(xì)胞株培養(yǎng)技術(shù)的幾大要點(diǎn)，趕緊拿起小本本記好了,！

一,、取材

細(xì)胞株培養(yǎng)的材料主要來源于外科手術(shù)或活檢瘤組織，取材時(shí)避免用壞死組織,，要挑選瘤細(xì)胞集中和活力較好的部位,，瘤性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是較好的培養(yǎng)材料。取材后盡快培養(yǎng),，因故不能立即培養(yǎng)者,，可凍存。細(xì)胞株的培養(yǎng)方法及凍存方法同前述正常組織,。

二,、成纖維細(xì)胞排除

在細(xì)胞株培養(yǎng)中常混雜有一些成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)時(shí)能與瘤細(xì)胞同時(shí)生長(zhǎng),，并常壓過癌細(xì)胞,，導(dǎo)致癌細(xì)胞生長(zhǎng)受阻以至消失，應(yīng)仔細(xì)排除,。排除方法常有：機(jī)械刮除法,、反復(fù)貼壁法、消化排除法,、膠原酶消化法等。

三,、提高細(xì)胞培養(yǎng)存活率和生長(zhǎng)率

根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),，細(xì)胞株要經(jīng)過對(duì)新環(huán)境的適應(yīng)才能生長(zhǎng)，因此不能局限于一般培養(yǎng)法,，須采用一些特殊措施,。如：用適宜底物，鼠尾膠原底層及飼細(xì)胞底層等,。用細(xì)胞生長(zhǎng)因子,，根據(jù)細(xì)胞種類不同選用不同的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子，如胰島素,，雌激素等,。也可以考慮動(dòng)物媒介培養(yǎng)。

總之,，在細(xì)胞株待轉(zhuǎn)化細(xì)胞數(shù)量明顯上升,，并出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)塊后，可轉(zhuǎn)入細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,，加培養(yǎng)基,，常溫培養(yǎng)半個(gè)月，一般每隔一周觀察一次,，決定是否換液,、傳代，靠譜的細(xì)胞株的每個(gè)步驟都至關(guān)重要,。細(xì)胞生長(zhǎng)達(dá)一定數(shù)量后凍存,，凍存前應(yīng)進(jìn)行核型分析和存檔。

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