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細(xì)胞培養(yǎng)需注意哪些過程

時間:2022/7/26閱讀:5953
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細(xì)胞培養(yǎng)

一、準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗,、干燥與消毒,,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試等。


二,、取材
在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細(xì)胞,,經(jīng)過一定的處理后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材,。如是細(xì)胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程,。機體取出的組織細(xì)胞的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。理論上講各種動物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng),,實際上幼體組織比成年個體的組織容易培養(yǎng),,分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng)。取材后應(yīng)立即處理,,盡快培養(yǎng),,因故不能馬上培養(yǎng)時,可將組織塊切成黃豆般大的小塊,,置4℃的培養(yǎng)液中保存,。取組織時應(yīng)嚴(yán)格保持無菌,同時也要避免接觸其他的有害物質(zhì),。取病理組織和皮膚及消化道上皮細(xì)胞時容易帶菌,,為減少污染可用抗菌素處理。

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三,、培養(yǎng)
將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng),。如系組織塊培養(yǎng),則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部,,幾個小時后組織塊可貼牢在底部,,再加入培養(yǎng)基,。如系細(xì)胞培養(yǎng),一般應(yīng)在接入培養(yǎng)器皿之前進行細(xì)胞計數(shù),,按要求以一定的量(以每毫升細(xì)胞數(shù)表示)接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基。細(xì)胞進入培養(yǎng)器皿后,,立即放入培養(yǎng)箱中,,使細(xì)胞盡早進入生長狀態(tài)。


正在培養(yǎng)中的細(xì)胞應(yīng)每隔一定時間觀察一次,,觀察的內(nèi)容包括細(xì)胞是否生長良好,,形態(tài)是否正常,有無污染,,培養(yǎng)基的PH 是否太酸或太堿(由酚紅指示劑指示),,此外對培養(yǎng)溫度和CO2 濃度也要定時檢查。


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以上是細(xì)胞培養(yǎng)需注意哪些過程

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