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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>研域(上海)帶你了解血清保存應(yīng)注意事項(xiàng)
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):
1、需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中,,4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月,。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,,血清在凍入低溫冰箱前,,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?br/>
2,、熱滅活是指56℃,,30分鐘加熱已*解凍的血清,加熱過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻,,此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活,。除非必須,,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量,。
補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮,, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化,。
3,、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,,待全部溶解后再分裝,。
在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,,減少沉淀的發(fā)生,。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,。
4、一般廠商提供的血清為無(wú)菌,,無(wú)需再過(guò)濾除菌,,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,,切勿直接過(guò)濾血清,。
5、血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量,。可用離心3000rpm,,5分鐘去除,,也可不用處理。
顯微鏡下“小黑點(diǎn)":經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,,沉淀物的形成會(huì)顯著增多,。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象“小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染,。
一般情況下,,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質(zhì)量,,則應(yīng)立即停止使用,,更換另一批號(hào)的血清,。
6、切勿將血清在37℃放置太久,,否則血清會(huì)變得渾濁,,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質(zhì)量。
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