微生物具有容易變異的特性,，因此，在保藏過程中,，必須使微生物的代謝處于zui不活躍或相對靜止的狀態(tài),，才能在一定的時間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。
低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,，所以,，菌種保藏方法雖多,，但都是根據(jù)這三個因素而設(shè)計的。
保藏方法大致可分為以下幾種：
1.傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng),、穿刺培養(yǎng),、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細(xì)菌用）,，培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存,。
2.液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長保藏時間,，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,，以減弱代謝作用,。
3.載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,，如土壤,、沙子,、硅膠,、濾紙上,，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛,。
4.寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,，如病毒,、立克次氏體、螺旋體等,，它們必須在生活的動物、昆蟲,、雞胚內(nèi)感染并傳代,，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法,。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏,。
5.冷凍保藏法
可分低溫冰箱（-20—-30℃,，-50—-80℃）,、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。
6.冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）,。
有些方法如濾紙保藏法,、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來制備細(xì)胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對細(xì)胞的損害,。保護(hù)性溶質(zhì)可通過氫和離子鍵對水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型,。保護(hù)劑有牛乳、血清,、糖類,、甘油、二甲亞砜等,。
