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當(dāng)前位置:研域(上海)化學(xué)試劑有限公司>>技術(shù)文章>>研域共享:關(guān)于生物試劑的洗刷方法
洗刷是實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)程中看似很簡單但又至關(guān)重要的一個進(jìn)程,,所以今日我司給一些建議和輔導(dǎo)來給你們廣泛一下生物試劑這方面小常識,。一同來看看吧,!
1. 自動洗板機(jī):每孔參與洗刷液350μl,,注入與吸出距離60秒,。洗板5次,。
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2. 手藝洗板:甩盡孔內(nèi)液體,,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗刷液350μl,,浸泡1-2分鐘,,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干,。洗板5次,。
生物試劑實(shí)驗(yàn)初步前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,;試劑或樣品制造時,,均需充沛混勻,并盡量避免起泡,。
1.加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,,留意不要有氣泡,,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,,悄然晃動混勻,。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時,。為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,,每次實(shí)驗(yàn)請運(yùn)用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,,每個孔中參與Detection Ab工作液 100μl(在運(yùn)用前15分鐘內(nèi)制造),,酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時,。
3.棄去孔內(nèi)液體,,甩干,洗板 3次,,每次浸泡1-2分鐘,,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干,。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)制造)100μl,,加上覆膜,37℃溫育1小時,。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板5次,,方法同進(jìn)程3。
6.每孔加底物溶液100μl,,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)踐顯況酌情縮短或延伸,,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔呈現(xiàn)明顯梯度時,,即可中止),。
7.每孔加中止液50μl,中止反響,,此時藍(lán)色立轉(zhuǎn),。中止液的參與次第應(yīng)盡量與底物液的參與次第相同。
8.生物試劑立即用酶標(biāo)儀在450nm波長丈量各孔的光密度(OD值),。應(yīng)提早翻開酶標(biāo)儀電源,,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序,。
9.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將未用完的試劑按規(guī)則的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束,。
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