Q1.標曲不顯色或顯色很弱,，樣本顯色

溶解標準品以及倍比稀釋時，未渦旋震動或不夠充沛,。標準品溶解,、倍比稀釋時均需要渦旋震動以確保充沛混勻。單純依托移液器重復(fù)吹打,，效率較低,、作用也不一定jia。

Q2.標曲和樣本均不顯色

在孵育階段靜置在桌面上,，這樣非常不利于抗原抗體之間的充沛接觸,，導(dǎo)致顯色偏弱。引薦孵育階段,，運用ELISA的微孔板振蕩器,，調(diào)至適宜的頻率,，使抗原抗體充沛接觸，確保結(jié)合作用,。

Q3.標曲顯色,，樣本不顯色

當(dāng)樣本中意圖蛋白濃度極低或許樣本中干擾因素較強，就無法檢測到?，F(xiàn)在ELISA仍然是蛋白檢測靈敏度gao的方法,，與不同技術(shù)結(jié)合后，衍生出了多種類型的ELISA,，提高了檢測靈敏度,。

Q4.標曲和樣本都顯色，但復(fù)孔的CV大

這個問題就跟移液器和試驗者的操作有關(guān)了,。移液器的運用保護不標準,，就會形成移液的差錯較大；試驗者自身的操作習(xí)氣,、加樣的一致性對復(fù)孔的CV也有很大影響,。把握移液器的正確運用和保護。關(guān)于個人的操作可操練移液動作,、加快速度,，確保移液的精密度。

Q5.本底偏高,，樣本值測不到

標曲的本底即Blank孔的OD值一般要求控制在0.1以下(對于高敏ELISA可以適當(dāng)放寬要求)。尤其是樣本值特別低的時分,，本底過高會掩蓋意圖信號,，導(dǎo)致無法測到樣本值。
在參加TMB顯色后,，需實時調(diào)查標曲顯se狀況,。通常在S5孔有肉眼可見的微弱藍色，即可停止反應(yīng),。

Q6.樣本經(jīng)不同梯度稀釋,，核算得到的樣本值差異較大

有時分我們不清楚樣本中意圖蛋白的濃度怎么，應(yīng)該怎么稀釋,，那么我們就會做下預(yù)試驗,，確認稀釋倍數(shù)。然而有時分同一樣本做了幾個不同梯度稀釋后,，核算得到的樣本值之間差異較大,，應(yīng)該選擇哪一個稀釋倍數(shù)呢？

Q7.不同試劑盒中的組分能否通用

除非是公用的試劑如洗液,、檢測緩沖液,，其它組分不主張用其它試劑盒的組分,，乃至是同一指標不同批次的試劑盒里的組分。這些組分(包含標準品,、標準品稀釋液,、檢測抗體、酶等)都是經(jīng)過優(yōu)化的,，假如貿(mào)然運用其它試劑盒的組分,，有可能對結(jié)果產(chǎn)生影響。