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研域解析:酶聯(lián)免疫吸附法

時間:2020/1/16閱讀:1810
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原理:可用于測定抗體,也可用于檢測杭原,。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反響將待測物與酶連接,,然后通過酶與底物發(fā)生顏色反響,用于定量測定,。酶聯(lián)免疫吸附法測定的對象可所以抗體也可所以抗原,。3種必要的試劑: 

①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑); 

②酶符號的抗原或抗體(符號物); 
③酶效果的底物(顯色劑),。

ELISA進程包括:抗原吸附在固相載體上,,這個進程稱為包被,加待測抗體, 再加相應酶符號抗體,,生成抗原--待測抗體--酶符號抗體的復合物,,再與該酶的底物反響生成有色產(chǎn)品。借助分光光度計的光吸收核算抗體的量,。

依據(jù)檢測意圖和操作過程不同,,有以下三種類型的常用辦法:

a、間接法  

此法是測定抗體zui常用的辦法,。將已知抗原吸附于固相載體,。加人待檢標本(含相應抗體)與之結合。洗刷后,,加人酶標抗球蛋白抗體(酶標抗抗體)和底物進行測定,。

b、雙抗體夾心法  

酶聯(lián)免疫吸附法此法常用于測定抗原,。將已知抗體吸附于固相載體,,加人待檢標本(含相應抗原)與之結合。溫育后洗刷,,加人酶標板中,。

c、競爭法  

此法可用于抗原和半抗原的定量測定,,也可用于測定抗體,。以測定抗原為例,將特異性抗體吸附于固相載體,。參加待測抗原和一定量的酶標已知抗原,,使二者竟爭與固相抗體結合;通過洗刷分離,,zui后結合于固相的酶標抗原與待測抗原含量呈負相關,。

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