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關(guān)于細(xì)胞因子ELISA試劑盒的試驗(yàn)條件

時(shí)間:2019/12/31閱讀:1514
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細(xì)胞因子ELISA試劑盒液體類標(biāo)本: 包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。

血清: 室溫血液自然凝結(jié)10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。 

血漿: 應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。細(xì)心搜集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。

尿液: 用無(wú)菌管搜集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實(shí)施,。

細(xì)胞培養(yǎng)上清: 檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管搜集,。

ELISA試劑盒的試驗(yàn)條件如下:
    
1,、固相載體的挑選:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板,、試管,、珠粒等。 
    
2,、包被抗體或抗原的挑選:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時(shí),,要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。
    
3,、 酶標(biāo)記抗體作業(yè)濃度的挑選:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定,。然后再固定其它條件或采取“方陣法",在正式試驗(yàn)體系里準(zhǔn)確地滴定其作業(yè)濃度,。
    
4,、酶的底物及供氫體的挑選:對(duì)供氫體的挑選要求是價(jià)廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無(wú)色。

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