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在細(xì)胞培育中怎么消除組織培育的污染呢,?

時間:2019/9/19閱讀:1699
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當(dāng)重要的培育污染時,,研究者可能企圖消除或控制污染。首要,,確定污染物是細(xì)菌,、真菌、支原體或酵母,,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔脫離,,用試驗室消毒劑消毒培育器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器,。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細(xì)胞系,,因而,做劑量反應(yīng)試驗確定抗生素和抗霉菌素發(fā)生的劑量水平,。下面是我司推薦的確定水平和消除培育污染的試驗過程: 

 

?1. 在無抗生素的培育基中消化,、計數(shù)和稀釋細(xì)胞,稀釋到慣例細(xì)胞傳代的濃度,。 

 

2. 渙散細(xì)胞懸液到多孔培育板中,,或幾個小培育瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi),,把選擇抗生素加入到每一個孔中,。

 

3. 每天觀測細(xì)胞目標(biāo),如脫落,,出現(xiàn)空泡,,匯合度下降和變圓。 

 

4. 確定抗生素水平后,,使用低于濃度2~3倍濃度的抗生素的培育液培育細(xì)胞2~3代,。 

 

5. 在無抗生素的培育基中培育細(xì)胞一代。 

 

6. 重復(fù)過程4,。 

 

7. 在無抗生素的培育基中培育4~6代,,確定污染是否以已被消除。

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