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胎牛血清運用中遇到的常見問題

時間:2019/4/30閱讀:1781
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1,、 怎樣貯存和凍結血清才不會使產(chǎn)質量量受損?
將血清從冷凍箱取出后,,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,。但必須留意的是,,融解過程中必須規(guī)矩地搖晃均勻。長時間貯存在2-8℃時,,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素,、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)或許集合而形成沉積或可見的混濁,。因而,,推薦在-20℃以下貯存血清,并防止反復凍融,。
咱們主張血清應保存在-2O℃,。若存放于4℃時,請勿超越一個月,。若一次無法用完一瓶,,主張無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀龋俜呕乩鋬觥?/p>

2,、血清中包括絮狀沉積,,它們是什么,怎樣處理?
沉積包括纖維蛋白和脂蛋白,。這是正常特性,,不會影響產(chǎn)品性質。要除掉沉積,,離心血清(400g,,1-2分鐘)或許簡略的讓其沉積在瓶子底部,將血清當心的轉移到另一個無菌瓶里(一般不主張采用過濾的方法除掉沉積,,因為沉積會堵塞濾膜而無法過濾),。大多情況悄悄搖擺沉積并加熱至37℃就會再溶解。所以,,運用產(chǎn)品時要搖擺并加熱血清至37℃,,沉積會自然消失。

3,、實驗室怎樣選擇適合的血清?
國內一致以為HYCLONE的血清是好的,,可是依據(jù)我在北美的閱歷,國外一般以為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價格決定質量,,可是總的來說這兩種價格普遍偏貴,,一般不是太嬌氣的細胞,,國產(chǎn)的就夠用了,。此外,,因為國內HYCLONE,,GIBCO并沒有生產(chǎn)線,,咱們只能從代理商那里買,,而代理商又魚龍混雜,,所以買到假貨的或許性也很大,。所以,,我一般會從直銷員那里買血清,,有的國外生物公司因為剛剛進入我國,度不高,,可是其實在國外現(xiàn)已做得很不錯了,,如Wisent等,,他們在國內有辦事處,,我會從那里拿,,血清的質量和HYCLONE平起平坐,,但價格相對優(yōu)惠很多,。

4,、 怎樣防止血清中發(fā)生沉積?
按如下操作可防止沉積的發(fā)生:
(1)凍結血清時,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉積的發(fā)生,。
(2) 血清分裝凍存時,須規(guī)矩搖晃均勻(當心勿形成氣泡),,使溫度與成分均一,。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃凍結,因溫度改變太大,簡單形成蛋白質凝結而發(fā)生沉積,。
(4) 勿將血清置于37℃太久,,否則血清會變得污濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因而受到破壞,,然后影響血清的質量,。
(5) 血清的熱滅活十分簡單形成沉積物的增多,若非必要,,可以無須做此過程,。
(6) 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,,30分鐘的準則,,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,,時間過久或搖晃不均勻,,都會形成沉積物的增多。

5,、小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與留意事項?
來歷不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。

組份與份額不同:兩者所含的促細胞成長因子,、促貼附因子,、激素及其他活性物質等組份與份額不同,用途與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才能成長,,而有些細胞只需小牛血清即可,,運用濃度不同,一般在5%-10%,,有特殊要求的濃度在20%,。
血清保存和運用須留意:血清應保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不行超越一個月,。凍結血清時 ,,應先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,,然后至室溫放置使之升溫,,不行將冷凍的血清直接放入37℃水浴或許溫箱中,如放在37℃凍結,,色彩加深,,粘稠度也會添加,血清在凍結和熱滅活后,,應按用量分裝并于-20℃保存,,防止反復凍融,。

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