做細胞生物學(xué)實驗,，細胞鋪板大概是常見的一個實驗,。但是有很多人不是很得要領(lǐng),，鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀,，要么周圍密中間禿頂,。怎么辦呢？以下來自研域技術(shù)人員詳細解析,，請收好了,！

    一般96孔板，每孔是加100微升細胞懸液,，從孔的左邊靠近底部加入,，加完半邊板后，將未加的細胞懸液混一下再繼續(xù)加剩余的半邊板子,，都加完后蓋上蓋子,，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣,，注意把握力度（一般輕巧敲三下）,，太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好）,，依次敲擊剩余三個邊,，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱,。

    6孔板,、12孔板或24孔板，均可采用將個孔加入少量無血清培養(yǎng)基,，晃動浸潤整個孔底,，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底,，其它孔一次類推,，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底,，加細胞懸液的時候可以避免加在中間,，中間細胞多，而加在周邊晃勻后會出現(xiàn)周邊細胞多中間少的現(xiàn)象,，細胞分散較均勻,，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。

    細胞懸液加完后,，將細胞培養(yǎng)板抬高,，對著燈光,，從底部往上看，看細胞有沒有抱團,。然后從底部敲擊,，使之分散。如果實驗室有平板振蕩器的話,，建議用這個儀器稍振蕩一下,，效果不錯，振幅小,，頻率高,。

    細胞要盡量打散，大部分呈單個狀態(tài),。離心后,，要充分懸浮。還有轉(zhuǎn)移到六孔板后,，需要晃動,，晃的時候不要讓細胞液轉(zhuǎn)圈，不然細胞就全被帶到中間去了,，就會不均勻,。
  
    一瓶細胞長滿后，正常處理,，在培養(yǎng)瓶里吹勻，然后鋪6孔板,，每孔2毫升,，鋪完之后不用觀察直接用酒精棉擦拭，然后放到培養(yǎng)箱里,，輕微的左右前后各三圈,。基本上24小時之后再觀察,，每孔的細胞都會很均勻,。

    計算好所需要的全部液體量和細胞量，混勻后,，加到六孔板里,，六孔板按橫8字型晃，顯微鏡下觀察,，如果不均勻,，按上述方法再晃。如果細胞未計數(shù)直接種的話,，在種六孔板的過程中,，隨時晃一下混勻用的瓶子,。 

    放在水平板面上先上下移動，再左右移動,，每個方向5到6次,，但關(guān)鍵的是搖晃后直接放入培養(yǎng)箱中，不要再做過多的運動,，例如放到鏡下去看,，否則很容易就又聚到中間去了。

    以上呢,，就是如何把細胞鋪板鋪均勻的方法,，以上技術(shù)文獻僅供參考，如您還有疑問您可來咨詢我司技術(shù)專員,，為您答疑解難,！