ELISA檢測試劑盒屬固相免疫測定,，抗原,、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生,。以抗體包被的夾心法為例,，加入板孔中的標本,，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機會,，只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸,。這是一個逐,，因此需經(jīng)擴散才能達到反應(yīng)的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此,。這就是為什么ELISA檢測試劑盒反應(yīng)總是需要一定時間的溫育,。

       溫育常采用的溫度有43℃、37℃,、室溫和4℃（冰箱溫度）等,。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度,。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,，實驗表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時,，產(chǎn)物的生成可達,。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度,，有些試驗在43℃進行,，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反應(yīng)4℃更為*,，在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中，以形成zui多的沉淀,。但因所需時間太長,，在ELISA檢測試劑盒中一般不予采用。

Elisa試劑盒保存條件：

1)未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存,。請注意,，收到試劑盒后請盡快將標準品、檢測溶液A,、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃,。
2)使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存，開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕,。