一. 實驗?zāi)康?/p>

    植物細(xì)胞和組織培養(yǎng)的技術(shù)性強(qiáng),，要求無菌操作,，通過本實驗可初步掌握常規(guī)的組織培養(yǎng)技術(shù)，加深對無菌操作的了解,。

    二.實驗原理

    植物的性：植物體的任何一個細(xì)胞都具有生長分化成為一個完整植株的能力,，稱為植物的性,。

    植物組織培養(yǎng)就是利用植物的性進(jìn)行離體無菌植物培養(yǎng)的一門技術(shù)。植物組織培養(yǎng)按其原始意義,，就是指愈傷組織培養(yǎng),。但發(fā)展至今，其范圍日益擴(kuò)大,，已包括植物和它的離體器官,、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體的離體無菌培養(yǎng),。因此,，擁有幾種不同水平的培養(yǎng)技術(shù)，即整體的,、器官的,、組織的、細(xì)胞的和原生質(zhì)的培養(yǎng)技術(shù),。

    本實驗選擇豌豆為材料,，豌豆（Pisumsativum）屬豆科植物，是糧食,、飼料和重要的蔬菜作物,，也是遺傳學(xué)家和植物生理學(xué)家感興趣和樂于采用的實驗植物，豌豆的根,、莖,、子葉、下胚軸,、上胚軸,、花芽等外植體，皆可形成愈傷組織,，其中莖尖,、幼胚、幼葉等器官可成功的再生成植株,。莖尖培養(yǎng)可包括小至十幾微米的莖尖分生組織（生長點）和大至幾十毫米的莖尖或更大的芽培養(yǎng),。在實踐應(yīng)用上，常采用生長點的培養(yǎng)使患病植物去病毒,，以達(dá)到挽救優(yōu)良品種,，提高產(chǎn)量和質(zhì)量之目的。

    三．實驗材料

    儀器設(shè)備：1．酒精燈,、三角燒瓶,，培養(yǎng)皿；2．鑷子,、剪刀,、剖針,；3．雙筒解剖顯微鏡；4．光照培養(yǎng)箱或溫室,；

    材料煙草無菌苗,、豌豆幼苗。

    試劑

    （1）MS培養(yǎng)基,，植物激素：NAA,、6-BA等；

    （2）飽和漂液（次氯酸鈉）,；

    （3）70%酒精,、100%酒精、酒精棉球,；

    （4）無菌水

    四．實驗步驟

    豌豆苗的莖尖培養(yǎng)

    ⑴取發(fā)芽6天的豌豆幼苗10株,，簡取1厘米左右的莖尖，浸入70%的酒精中1分鐘,，再浸入飽和次氯酸鈉溶液中消毒15分鐘,，（此步以后要求無菌）用無菌水中沖洗5次，在滅菌的濾紙上吸干水分,，放入滅菌的培養(yǎng)皿中,。

    ⑵在雙目解剖鏡下，用滅菌的解剖針剝?nèi)ビ兹~露出生長錐,，用滅菌的解剖針挑取帶著兩至三個葉原基的生長錐。

    ⑶將挑好的莖尖移到MS+10.7μmol/L萘乙酸(NAA)+4.4μmol/L6-芐基腺嘌呤（6-BA）的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織形成,，用封口膜將培養(yǎng)皿封好,。在恒溫培養(yǎng)箱中，26℃下,培養(yǎng)六周,，形成愈傷組織,，經(jīng)繼代后，可用于生根培養(yǎng)