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如何提高ELISA的重現性,?

時間:2018/11/5閱讀:1469
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免疫檢測法的性表現為單次實驗孔間(批內)的重復性和多次實驗之間(批間)的重復性,。CV值高則表明度低,通常由以下兩個原因造成:移液技術和洗滌技術,。

 

移液技術

1. 移液時,,槍頭應對準孔中央,避免接觸孔壁及底部,。

2. 移液后輕輕晃動混勻試劑,。

3. 如果您的樣品具有黏性,請預先潤洗槍頭以消除表面張力的影響,。吸液時等待片刻使體積平衡后再取出,。

4. 移液不充分或移液體積不均,說明移液器需要校正,。必要時請檢查移液器并重新校正,。

5. 加樣時,不同的試劑標準品和樣本間都要確保更換槍頭,,避免交叉污染,。

6. 確保使用合適的槍頭。不合適的槍頭無法正確量取吸液和加樣的體積,。

 

洗滌技術

1. 如果使用自動洗板機或多通道移液器,,請確保進出口能正常運作。

2. 后一次洗滌后,,翻轉酶標板倒出多余的洗滌液,,并在吸水紙上拍干液體。洗板太快或太慢都會降低度,。不能讓孔內液體自然風干,需立即進行下一步操作。

3. 按照說明書,,添加足量的洗滌液至孔內,,并保證洗滌*。

4. 由于洗滌液不是通用的,,當試劑盒內的洗滌液用完時,,請不要使用其他試劑盒中的洗滌液。如有需要,,可聯系技術支持尋求幫助,。

5. 不要減少洗滌時的浸泡時間或跳過浸泡的步驟。

6. 按照說明書上推薦的洗滌次數清洗,,隨意改變洗滌的次數會影響實驗的性,。

 

貯液瓶

        為避免污染,不同的試劑使用不同的貯液瓶,。一些試劑或樣本很容易被污染(比如唾液,、氧化劑等),請參考說明書操作,。必要時候采取一些預防措施保護溶液,。

 

封板覆膜

        使用過的封板覆膜可能含有上一步實驗殘留的試劑,如果重復使用會造成孔板污染,,從而導致性低,。建議每一次孵育使用新的封板覆膜。

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