按ELISA試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾 水或去離子水,，包括用于洗滌的,，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正,。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用,。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
ELISA試劑盒的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,，注意每批的細(xì)節(jié),。在使用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶,，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。 一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml,。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒,、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。為了優(yōu)化靈敏度,，建議孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,，疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn),。    本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn),，ELISA檢測(cè)試劑盒珠式、管式及磁性球ELSIA,，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,。
可用作ELISA試劑盒測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清 ）,、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液,、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體 或抗原成份。ELISA試劑盒有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清 ,、尿液）,，有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。這些標(biāo)本收集的時(shí)間,、方法和保存都有一定的要求,。