按ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾 水或去離子水,，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的,。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正,。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存,。
ELISA試劑盒的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),，注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,，瞬時(shí)離心試劑瓶,，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書(shū)中的細(xì)節(jié),，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶,。 一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml?？衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒、第三類(lèi)試劑,、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。為了優(yōu)化靈敏度，建議孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本,。若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng),，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物ELISA試劑盒酶的活性,。
ELISA試劑盒的操作因固相載體的形成不同而有所差異,，國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn),。    本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，ELISA檢測(cè)試劑盒珠式,、管式及磁性球ELSIA,，國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用。
可用作ELISA試劑盒測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,，體液（如血清 ）,、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體 或抗原成份,。ELISA試劑盒有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清 ,、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）,。這些標(biāo)本收集的時(shí)間,、方法和保存都有一定的要求。