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ELISA試劑盒中陰性本底的形成原因

時間:2018/2/6閱讀:1883
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ELISA試劑盒供應商,,多年的銷售經驗使我們更加了解產品,。今天我們就談ELISA中陰性本底的形成原因,。酶聯(lián)固相免疫實驗中,,尤其在簡介ELISA法中,經常會碰到陰性本底的問題,。主要是本底過高和不同標本的本底值差異較大,。本底或稱背景,是ELISA中的非特異性顯色,。底物未經過酶作用而呈現(xiàn)的顏色稱為空白,。底物液如配制不當會出現(xiàn)一定的空白值。這個空白值只要不太高(A<0.05),,可從個測定值中減除,,并不影響實驗結果。這里研究的是不含待測抗原或抗體的陰性標本在ELISA中出現(xiàn)的本底,。從理論上講,,只有陽性標本zui終才能引出顯色反應,在以下情況
ELISA試劑盒在酶免疫測定中,ELISA的特點是利用固相載體作為分離游離和結合的酶結合物的手段,。固相載體與吸附在其上的抗原會抗體形成固相抗原或固相抗體,,即免疫吸附劑。通常所用的固相載體聚苯乙烯其表面主要是疏水基團,,通過疏水鍵與蛋白質結合,。之中吸附式物理性的非特異性吸附,雖然蛋白質的分子量,、等電點,、濃度等對吸附的量有一定的影響,但總的來說各種蛋白質均能吸附在聚苯乙烯載體的表面,。因此除在包被時有目的地使抗原或抗體吸附在載體上,,在ELISA各個步驟中均有可能發(fā)生干擾物質的吸附,使zui終產生與受檢抗原-抗體反應無關的顯色,,這是形成本底的主要原因,。
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