牛血清是細胞培養(yǎng)基中的中藥成份之一。在培養(yǎng)基中加入適量血清（10%）,，首先可以補充細胞生長所需的生長因子,、激素、帖附因子等,，其次它具有解毒作用,，能解除脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性,；再次,，它還能中止胰酶的作用,，并保護細胞免受機械損傷等。但是血清成分復(fù)雜,，不同來源,、不同批號生產(chǎn)的血清對細胞生長作用的差異較大。血清的保存期只有一年,，不同存放時期的血清的效力也不同,。所以,，當(dāng)新購得的血清或要在開始一個重大試驗的時候,，應(yīng)首先進行牛血清的篩選。 篩選時,，通常選用正常的二倍體細胞和不太好養(yǎng)的腫瘤細胞,，也可以使正要準(zhǔn)備培養(yǎng)的細胞。另外,，用已知血清作對照,。 

儀器、材料和試劑 
儀器 
CO2 培養(yǎng)箱,，超凈工作臺,，微量加樣器，滅菌鍋 
材料 
96孔培養(yǎng)板,，刻度吸管,，移液管，試管,，吸管,，廢液缸，血球計數(shù)板,，HeLa細胞,，Mel細胞 
試劑 
DMEM，不同批號的血清,，胰酶,，雙抗 
 

實驗步驟 
1.取HeLa細胞和Mel細胞（本來應(yīng)該取正常的二倍體細胞和不太好養(yǎng)的腫瘤細胞，但是實驗室條件有限,，本組做HeLa細胞）,，胰酶消化后，用無血清培養(yǎng)基（事先加雙抗）吹打成細胞懸液（避免以前血清的干擾）,。計數(shù),。 
2.取4000個左右的HeLa細胞加入到每行的*孔（在加之前要震蕩培養(yǎng)基）。本實驗經(jīng)計數(shù)后應(yīng)加11μL細胞,。 
3.在A和H行中*孔加入89μL含標(biāo)準(zhǔn)血清（2004.12）的培養(yǎng)基,。（對照組） 
4.在A和H行中每一孔中加入100μL含標(biāo)準(zhǔn)血清的培養(yǎng)基,。 
5.將*孔中的液體吸100μL至第二孔，從第二孔吸100μL至第三孔,，然后相同,。zui后的100μL棄掉。這樣就形成了從*個孔到zui后一個孔的細胞梯度從大約2056,，1028等至1個,。（要吹細均勻） 
6.每個孔再補加100μL含標(biāo)準(zhǔn)血清的培養(yǎng)基。這可以保證孔中的營養(yǎng)物質(zhì),。 
7.在B行采取同樣的方法,。白介素ELISA試劑盒不同的是用含有需篩選的批號為011217血清代替標(biāo)準(zhǔn)血清。 
8.在C至G行采用同樣的方法,。血清批號分別是030224,，040528，040830,，041012,，041016。 
9.將96孔培養(yǎng)板放入CO2 培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)一周,。 
10. 培養(yǎng)結(jié)束后,，觀察細胞生長的情況。比較在同一細胞濃度下的不同學(xué)清對細胞生長的影響,。在同一細胞濃度下細胞生長數(shù)zui多的培養(yǎng)基所含有的血清即可作為被選擇的血清樣品,。