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標(biāo)本保存不當(dāng): 在冰箱中保存過久的標(biāo)本,,血清中IgG可聚合成多聚體,、AFP可形成二聚體,,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深,、甚至造成假陽性,;標(biāo)本放置時(shí)間過長(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,,亦可出現(xiàn)假陰性,。為克服上述干擾,ELISA測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集,;如不能立即測(cè)定,,5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,,蛋白質(zhì)局部濃縮,,分布不均,應(yīng)充分混合后再測(cè)定,,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,,不可強(qiáng)烈振蕩。
標(biāo)本凝集不全: 在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,,18~24h*凝固。臨床檢驗(yàn)工作中,,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),,常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,,在ELISA測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,,易造成假陽性結(jié)果。
標(biāo)本受細(xì)菌污染: 因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,,因此,,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果,。
標(biāo)本溶血: 由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,,干擾測(cè)定結(jié)果。為克服上述干擾作用,,標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血,。
標(biāo)本采集解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?nbsp;
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