DEAE-Sephadex A-50（簡稱A-50）為弱堿性陰離子交換劑,，經過NaOH處理將Cl-型轉為OH-型后,，可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白屬中性蛋白,，等電點為pH6.85～7.5,，其余均屬酸性蛋白,。在溶液為pH8.0時，酸性蛋白均被A-50 吸附,。從而可分離純化IgG,。

1. 批量吸附法
此法可在1天內完成提取過程,，純化前后樣品體積變化不大，所得IgG無變性現象,，抗體效價亦無明顯降低,。制品可達PAGE及免疫電泳純。適用于提純人,、羊,、兔等血清中的IgG。

【材料和試劑】
（1）DEAE-Sephadex A-50,。
（2）PB緩沖液：0.01mol/L,，pH6.5 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液。

【操作步驟】
（1）A-50的預處理：稱取4～6g A-50懸浮于500～1000ml蒸餾水中,，1h后傾去上層細粒,。然后將A-50浸泡于0.5mol/L NaOH液（60～100ml）中，攪拌后靜置30min,，以蒸餾水洗至中性,，再用0.1mol/L NaH2PO4同上操作過程處理，蒸餾水洗至中性,。zui后用0.01mol/L,，pH6.5 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液（PB）平衡，減壓抽干,，保存?zhèn)溆谩?/p>

（2）吸附提?。喝?5ml血清加等量0.01mol/L，pH6.5 PB稀釋至30ml（也可不稀釋）,，加入1/4體積濾干的DEAE-Sephadex A-50（相當于干重1g）混合,。室溫（或4℃）浸泡1 h后過濾，收集濾液,。再加入同樣體積的DEAE-Sephadex A-50重復上述處理過程共3次,，亦可在血清內加入過量DEAE-Sephadex A-50吸附處理一次。收集濾液合并,，即為提純的IgG制品?；蛟偻肝鋈},，濃縮、凍干保存?zhèn)溆谩?/p>

2．A-50柱層析法
【材料和試劑】
（1）DEAE-Sephadex A-50,。
（2）待純化標本：雜交瘤腹水或培養(yǎng)上清,，免疫血清或飽和硫酸銨粗提品。
（3）1.5×50cm 層析柱,；透析袋及其他透析和層析所需的試劑和器材,。
（4）PB緩沖液：0.1mol/L,，pH7.4 Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液。

【操作步驟】
（1）A-50經酸堿處理,，平衡至中性后,，浸泡于0.1mol/L，pH7.4 PB中,，置4℃冰箱儲存?zhèn)溆谩?br />（2）裝柱：同DE52,。
（3）平衡：松開出水口螺旋夾，以PB平衡,，控制流速為15滴/min,，待洗脫液與流出液之pH值達到一致時，停止平衡,。
（4）加樣,、洗脫、收集與濃縮：基本上同DE52,，以0.1mol/L PB洗脫,。
用過的DEAE-Sephadex A-50可用0.5mol/L Na2HPO4洗脫回收。洗至流出液中無蛋白（OD280nm<0.04）后再用蒸餾水洗至中性,，加入0.02％疊氮鈉于4℃保存?zhèn)溆谩?br />