光合儀應用開放式氣路系統(tǒng)或光合測定系統(tǒng)
具體操作方法如下:
1、 測定前的準備:包括開機預熱,、按差值標定方式標定IRGA、將測定用的儀器設備連接成一個開放系統(tǒng),。取葉片,,測定葉面積后將其放入葉室,調節(jié)控制葉室至葉片的光合作用適溫度,。
2,、 葉片照光及測定操作:
1. 改變光源和葉片之間的距離,使到達葉片表面的光強為200μmol·m·s左右,。待IRGA表頭上的指針穩(wěn)定在一個位置后讀取經(jīng)過葉片前后空氣CO2濃度變化的差值,,按開放式系統(tǒng)Pn的計算公式計算光合速率。
2. 在光源和葉片之間放置一至數(shù)層白紗布,,使到達葉片表面的強度每次減少50μmol·m·s,,并在每一光強度下停留2~3min后讀取空氣CO2濃度變化的差值,計算光合速率,,直到光強為零,,光合速率為負值時止。
3,、 繪制葉片光合作用對光的響應曲線:將測定的每組數(shù)據(jù)以光強為橫軸,,光合速率為縱軸,將每一光強下光合速率值畫到坐標紙上的相應位置,。再將大于0的光合速率值各坐標點用直線連接起來,,該直線的斜率便是葉片的表觀光合量子效率值。該直線與橫軸的交點為光補償點,,與縱軸的交點則為暗呼吸速率(圖2-10),。
由于實驗過程中一些難免誤差,所測各點未必都在一條直線上,,因此畫線時會帶有一些人為因素,,造成表觀光合量子效率值或高或低的誤差。為了避免這一誤差,,好是用計算器或計算機對這些光強-光合速率資料作直線回歸,,得到如下一直線回歸方程:
Pn=-R+Φ(PFD)
這里,Pn為光合速率,,R為暗呼吸速率,,Φ為表觀光合量子效率,PFD為到達葉片的光量子通量密度,,簡稱光強,。
操作時的注意事項
1. 為減小實驗誤差,,用于直線回歸的資料點應多一些,以7~8個為宜,。在作直線回歸時,,不要使用那些光合速率為負值的資料點。由于Kok效應的影響,,那些點往往明顯偏離直線,,使得到的Φ值偏高或偏低。
2. 本節(jié)介紹的是針對用和離體葉片進行的測定而言的,。目前先進的CIRAS-3光合作用測定系統(tǒng)具有控制溫度,、光強度等功能,可以方便地進行該指標的測定,。