激光共聚焦顯微鏡在生物學(xué)上的應(yīng)用
1.適用于細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞生理學(xué),、神經(jīng)生物學(xué)和神經(jīng)生理學(xué)等幾乎所有涉及細(xì)胞研究領(lǐng)域,。
2.對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行無損傷性的實(shí)時(shí)觀察分析,進(jìn)行形態(tài)和功能相結(jié)合的研究,。對(duì)細(xì)胞檢測(cè)無損傷,、、可靠和優(yōu)良重復(fù)性,;數(shù)據(jù)圖象可及時(shí)輸出或長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
3.對(duì)活細(xì)胞和組織或細(xì)胞組織切片進(jìn)行連續(xù)斷層掃描,能獲得精細(xì)的單個(gè)細(xì)胞或一群細(xì)胞或所觀察的局部組織的各個(gè)層面結(jié)構(gòu)(二維和三維)(包括細(xì)胞特異結(jié)構(gòu)-如細(xì)胞骨架,、染色體,、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系統(tǒng),樣品的深層結(jié)構(gòu))和完整的三維圖像(如分析隨時(shí)間變化,,即四維圖象,,也可進(jìn)行隨熒光波長(zhǎng)變化的圖象,即可達(dá)到更多維的圖象),。定位組織細(xì)胞及其他所需要觀察的對(duì)象結(jié)構(gòu)的空間位置,,進(jìn)行實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的觀察、分析和記錄,;分析的定性,、定量、定時(shí)和定位分布,。
4.熒光標(biāo)記探針標(biāo)記的活細(xì)胞或切片標(biāo)本的細(xì)胞生物物質(zhì),,膜標(biāo)記、細(xì)胞示蹤,、免疫物質(zhì),、免疫反應(yīng)、受體或配體,,核酸等觀察,;可以在同一張樣品上進(jìn)行同時(shí)多重物質(zhì)標(biāo)記,同時(shí)觀察。
5.細(xì)胞內(nèi)離子熒光標(biāo)記,,單標(biāo)記或多重標(biāo)記,,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)如pH和鈉、鉀,、鈣,、鎂等離子濃度的比率測(cè)定及其動(dòng)態(tài)變化;
6.細(xì)胞膜電位測(cè)量,,自由基的檢測(cè)等,;
7.進(jìn)行定位的熒光漂白恢復(fù)實(shí)驗(yàn),結(jié)合熒光漂白中熒光丟失實(shí)驗(yàn),,研究細(xì)胞間通訊和其他有關(guān)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)(分子等)的運(yùn)動(dòng),;在時(shí)間掃描實(shí)驗(yàn)和光漂白(光淬滅)實(shí)驗(yàn)中,可同時(shí)對(duì)每個(gè)通道的數(shù)據(jù)和圖象進(jìn)行同時(shí)輸出和轉(zhuǎn)換,。進(jìn)行熒光共振能量轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn),,通過熒光波長(zhǎng)的變化,研究細(xì)胞內(nèi)分子,、離子的運(yùn)動(dòng),,相互作用。
8.有非常(空間定位,、定量,、定波長(zhǎng)、定時(shí)間),、靈敏,、快速和能在同一時(shí)間內(nèi)完成對(duì)細(xì)胞組織多重?zé)晒鈽?biāo)記(即使是發(fā)射波長(zhǎng)非常接近,比如相差只有數(shù)nm的多重?zé)晒?的各種波長(zhǎng)圖象的分離和觀察分析,,以及多重?zé)晒鈽?biāo)記共定位等的在線測(cè)量分析功能
激光共聚焦顯微鏡在生物領(lǐng)域的*性
與傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡相比,, 激光共聚焦顯微鏡 具有更高的分辨率,實(shí)現(xiàn)多重?zé)晒獾耐瑫r(shí)可觀察并可形成清晰的三維圖像等優(yōu)點(diǎn),,在對(duì)生物樣品的觀察中,, 激光共聚焦顯微鏡 有如下*性:
1、對(duì)活細(xì)胞組織或細(xì)胞切片進(jìn)行連續(xù)掃描,,可獲得精細(xì)的細(xì)胞骨架,、染色體、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系統(tǒng)的三維圖像,。
2,、可以得到比普通熒光顯微鏡更高對(duì)比度、高解析度圖像,,同時(shí)具有高靈敏度,,杰出樣品的保護(hù),。
3、多維圖像的獲得,。如7維圖像(XYZaλIt):xyt ,、xzt 和xt掃描,時(shí)間序列掃描,、旋轉(zhuǎn)掃描,、區(qū)域掃描、光譜掃描,,同時(shí)方便進(jìn)行圖像處理,。
4,、細(xì)胞內(nèi)離子熒光標(biāo)記,。單標(biāo)記或多標(biāo)記,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)如PH和鈉,、鈣,、鎂等離子濃度的比率測(cè)定及動(dòng)態(tài)變化。
5,、熒光標(biāo)記,。探頭標(biāo)記的活細(xì)胞或切片標(biāo)本的活細(xì)胞生物物質(zhì),膜標(biāo)記,、免疫物質(zhì),、免疫反應(yīng)、受體或配體,、核酸等觀察,;可以在同一張樣品上同時(shí)進(jìn)行多重物質(zhì)標(biāo)記,同時(shí)觀察,。
6,、對(duì)細(xì)胞檢測(cè)無損傷、,、可靠和優(yōu)良重復(fù)性,;數(shù)據(jù)圖像可及時(shí)輸出或長(zhǎng)期儲(chǔ)存。