熒光顯微鏡的原理和結(jié)構(gòu)特點：
 

　　熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點光源,，經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍(lán)光4200入)作為激發(fā)光,、激發(fā)標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,，再通過物鏡和目鏡的放大進(jìn)行觀察,。這樣在強烈的對襯背景下,，即使熒光很微弱也易辨認(rèn)，敏感性高,，主要用于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能以及化學(xué)成分等的研究,。
 

　　熒光顯微鏡的基本構(gòu)造是由普通光學(xué)顯微鏡加上一些附件(如熒光光源、激發(fā)濾片,、雙色束分離器和阻斷濾片等)的基礎(chǔ)上組成的,。熒光光源——般采用超高壓汞燈(50一200W)，它可發(fā)出各種波長的光,，但每種熒光物質(zhì)都有一個產(chǎn)生*強熒光的激發(fā)光波長，所以需加用激發(fā)濾片(一般有紫外,、紫色,、藍(lán)色和綠色激發(fā)濾片)，僅使一定波長的激發(fā)光透過照射到標(biāo)本上,，而將其他光都吸收掉,。每種物質(zhì)被激發(fā)光照射后，在極短時間內(nèi)發(fā)射出較照射波長更長的可見熒光,。熒光具有專一性,，一般都比激發(fā)光弱，為能觀察到專一的熒光,，在物鏡后面需加阻斷(或壓制)濾光片,。
 

　　它的作用有二：一是吸收和阻擋激發(fā)光進(jìn)入目鏡、以免于擾熒光和損傷眼睛，二是選擇并讓特異的熒光透過,，表現(xiàn)出專一的熒光色彩,。兩種濾光片必須選擇配合使用。
 

　　熒光顯微鏡就其光路來分有兩種：
 

　　1.透射式熒光顯微鏡：激發(fā)光源是通過聚光鏡穿過標(biāo)本材料來激發(fā)熒光的,。常用暗視野集光器,，也可用普通集光器，調(diào)節(jié)反光鏡使激發(fā)光轉(zhuǎn)射和旁射到標(biāo)本上,。這是比較舊式的熒光顯微鏡,。其優(yōu)點是低倍鏡時熒光強，而缺點是隨放大倍數(shù)增加其熒光減弱.所以對觀察較大的標(biāo)本材料較好,。
 

　　2.落射式熒光顯微鏡這是近代發(fā)展起來的新式熒光顯微鏡,，與上不同處是激發(fā)光從物鏡向下落射到標(biāo)本表面，即用同一物鏡作為照明聚光器和收集熒光的物鏡,。光路中需加上一個雙色束分離器,，它與光鈾呈45。角,，激發(fā)光被反射到物鏡中,，并聚集在樣品上，樣品所產(chǎn)生的熒光以及由物鏡透鏡表面,、蓋玻片表面反射的激發(fā)光同時進(jìn)入物鏡,，反回到雙色束分離器，使激發(fā)光和熒光分開,，殘余激發(fā)光再被阻斷濾片吸收,。如換用不同的激發(fā)濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的組合插塊，可滿足不同熒光反應(yīng)產(chǎn)物的需要,。此種熒光顯微鏡的優(yōu)點是視野照明均勻,，成像清晰，放大倍數(shù)愈大熒光愈強,。