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冷凍超薄切片原理和使用

時(shí)間:2021-11-1 閱讀:1501
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冷凍超薄切片技術(shù)是一種為了研究更接近于生物生活狀態(tài)結(jié)構(gòu)和功能而發(fā)展起來(lái)的電鏡樣品制備技術(shù)。它是把樣品進(jìn)行冷凍固定后,,進(jìn)行超薄切片,省去了經(jīng)典超薄切片法的長(zhǎng)時(shí)間的固定,、脫水和也埋等處理,。下面給大家介紹冷凍超薄切片機(jī)操作,冷凍超薄切片的制備程序可為兩類,,我們一起看看吧,。

  1.無(wú)溶液制備法:包括取材、快速冷蹤,、冷凍替代

  ,、切片、干燥,、染色或不染色,、鏡檢等幾個(gè)步驟。主要用于可溶性物質(zhì)的放射白顯影和X射線微區(qū)分析,。

  2.固定樣品制備法:包括取材,、醛類闌定、樣品包埋或不包埋,、冷凍保護(hù)處IR,、快速冷凍切片、染包及鏡檢等步驟,。適用于進(jìn)行形態(tài)學(xué),、細(xì)胞化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)研究,。


  用戶經(jīng)培訓(xùn)后取得資格可自行使用超薄切片機(jī),,使用步驟如下:

  1)開(kāi)機(jī)

  2)檢查是否處于切片模式,檢查頂光底光是否亮度正常,;

  3)將包埋塊放入適當(dāng)夾頭并用六角扳手旋緊,,以固定包埋塊;(然后將夾頭安裝在修快臺(tái)進(jìn)行修快),;

  4)將夾頭放入機(jī)械臂,,并用手旋好螺絲上緊夾頭(不可用六角扳手);

  5)將玻璃刀/鉆石刀安裝在刀臺(tái)上,,用手旋好螺絲以固定刀,,并注意檢查刀臺(tái)是否固定于底座上;

  6)檢查刀間隙角,,調(diào)整刀臺(tái)角,,選擇適當(dāng)?shù)膴A頭角度等;

  7)設(shè)定切片窗口(上下范圍),;

  8)對(duì)刀,;

  9)選擇所用切片速度和厚度;

  10) 在刀槽內(nèi)注水,注意水面平整,;

  11) 切片,、撈片;

  12) 關(guān)機(jī),、清理切片機(jī),,拿走個(gè)人物品,保持切片臺(tái)面整潔,;

  13) 登記使用記錄,。


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