熒光顯微鏡(Fluorescencemicroscope):熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。
一般的徠卡熒光顯微鏡的光學(xué)元件,大都果用普通光學(xué)玻璃制造,。它們對30A以上的長波紫外線和可見光能很好地透過,因此完滿足——殷熒光顯微術(shù)的要求,,只是在個別情況下,,當(dāng)標(biāo)本必須用短波紫外線激發(fā)時,才需用石英玻璃或特種玻璃的聚光鏡和反射執(zhí)這時殘破片也必須是特制晰但在進射光顯檄術(shù)時,,物鏡和目鏡只需用普通光學(xué)玻璃即可,。如在反射光顯微術(shù)時,則物鏡必須能透過紫外光的,。
熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收,、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等,。細胞中有些物質(zhì),,如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光,;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,,熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一,。
熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成,。是利用一定波長的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。
熒光顯微鏡多采用200W的超高壓汞燈作光源,,它是用石英玻璃制作,,中間呈球形,內(nèi)充一定數(shù)量的汞,,工作時由兩個電極間放電,,引起水銀蒸發(fā),球內(nèi)氣壓迅速升高,,當(dāng)水銀*蒸發(fā)時,,可達50~70個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓力,這一過程一般約需5~15min,。超高壓汞燈的發(fā)光是電極間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發(fā)射光量子的結(jié)果,。它發(fā)射很強的紫外和藍紫光,足以激發(fā)各類熒光物質(zhì),,因此,,為熒光顯微鏡普遍采用。