一,、建議使用保護柱,，避免顆粒進入色譜柱，引起堵塞,；

二,、建議選擇合適pH范圍的色譜柱，避免填料溶劑老化,；

三,、緩沖鹽的正確使用：

緩沖鹽通常使用不當(dāng)會析出，堵塞篩板和填料,，使填料板結(jié),，柱壓升高，阻礙基質(zhì)上鍵合相的碳鏈自由舒展,，使色譜柱保留能力下降,，柱效降低，縮短其使用壽命,，緩沖鹽析出后很難去除,，因此正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱的使用壽命非常重要，具體方法如下：

“使用前過渡,，使用后沖洗,！”

1）等度條件：制備前后用過渡流動相沖洗柱體積不少于20-30個柱體積，或制備完成后用過渡流動相以1.0mL/min（根據(jù)柱規(guī)格調(diào)整）沖洗過夜,；

2）梯度條件：制備前,，用與初始流動相組成相同的流動相以工作流速沖洗色譜柱不少于20-30個柱體積,，制備后，用該過渡流動相沖洗色譜柱不少于20-30個柱體積,，且梯度盡量平緩,，避免緩沖鹽析出；

3）過渡流動相：有機相和水相的比例和分析流動相中兩相比例一致,，或者水相比例高于分析流動相,，*不含緩沖鹽；

四,、避免強保留物質(zhì)在色譜柱保留：

強保留物質(zhì)在色譜柱中的累積是一個緩慢的過程,，引起峰變寬和拖尾，使柱效下降,，保留時間變化,，柱壓長高；對復(fù)雜樣品很難判斷其是否含有強保留物質(zhì),，因此要預(yù)防這一切的方式,，堅持每天分析完成后用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱20個柱體積以上。

清洗方法：

1）未使用緩沖鹽,，每天使用完成后用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱20個柱體積以上；

2）使用緩沖鹽,，用上述方法去除緩沖鹽后,，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱20個柱體積以上；

3）補救方法：水→乙腈→異丙醇（或氯坊）→乙腈→水,，每一步需要沖洗不少于30個柱體積,。

注意：不要輕易打開柱頭，因為柱頭一旦打開,，很難恢復(fù)到新柱的水平,。