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色譜柱在使用之后的的延長(zhǎng)壽命的操作
色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,，稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞,。在色譜操作過程中,，需要注意下列問題，以維護(hù)色譜柱,。
?、佟”苊鈮毫蜏囟鹊募眲∽兓叭魏螜C(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況,；柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩(如前所述),。
?、凇?yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/div>
?、邸∫话阏f來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì),。否則反沖會(huì)迅速降低柱效。
?、堋∵x擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH)，以避免固定相被破壞,。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預(yù)柱為硅膠,，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
?、荨”苊鈱⒒|(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱,。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換,。
⑥ 經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì),。在進(jìn)行清洗時(shí)，對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,，每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,，即常規(guī)分析需要50~75ml。
?、摺”４嫔V柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥,。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長(zhǎng)時(shí)間,。
⑧ 色譜柱使用過程中,，如果壓力升高,，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗,；另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi),，使柱頭被污染,；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,，死體積增大,。
在后兩種情況發(fā)生時(shí)，小心擰開柱接頭,，用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內(nèi)填料整平,。然后用適當(dāng)溶劑濕潤(rùn)的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱，壓平,，再擰緊柱接頭,。這樣處理后柱效能得到改善，但是很難恢復(fù)到新柱的水平,。
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