超聲波細(xì)胞破碎儀原理就是將電能通過(guò)換能器轉(zhuǎn)換為聲能,,這種能量通過(guò)液體介質(zhì)而變成一個(gè)個(gè)密集的小氣泡,這些小氣泡迅速炸裂,,產(chǎn)生的像小炮彈一樣的能量,,從而起到破碎細(xì)胞等物質(zhì)的作用。
超聲波細(xì)胞破碎儀屬于精密儀器,,在使用時(shí)一定要注意一下幾點(diǎn)事項(xiàng):
1,、切記空載(一定要將超聲變幅桿插入樣品后才能開(kāi)機(jī),)
2、變幅桿(超聲探頭)入水深度:1.5Cm左右,,液面高度應(yīng)該有30mm以上,,探頭要居中,不要貼壁,。超聲波是垂直縱波,,插入太深不容易形成對(duì)流,影響破碎效率,。
3,、超聲參數(shù)設(shè)置:設(shè)置鍵好儀器工作參數(shù)(具體設(shè)置見(jiàn)說(shuō)明書(shū)),對(duì)于對(duì)溫度要求比較敏感的樣品(比如細(xì)菌)一般外面采用冰浴,,實(shí)際溫度肯定是低于25度,蛋白核酸肯定不會(huì)變性,。
1)時(shí)間:超聲時(shí)間每次不要超過(guò)5秒,,間隙時(shí)間應(yīng)大于或等于超聲時(shí)間,以便于熱量散發(fā),。時(shí)間設(shè)定應(yīng)以超聲時(shí)間短,,超聲次數(shù)多原則,可延長(zhǎng)超聲機(jī)子以及探頭的壽命,。
2)超聲功率:不宜太大,,以免樣品飛濺或起泡沫,如小于10ml樣品容量,,功率應(yīng)在200w以內(nèi),選用2mm超聲探頭,,另將面板后面的變幅桿選擇開(kāi)關(guān)打到相應(yīng)擋;10-200ml樣品容量的功率在200-400w,選用6mm超聲探頭,,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋,;200ml以上的樣品容量功率在300-600w之間,選用10mm超聲探頭,,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋,;(2MM的小探頭功率嚴(yán)禁超過(guò)350W)
3)容器選擇:有多少的樣品就選多大的燒杯,這樣也是有利樣品在超聲中對(duì)流,,提高破碎效率,。例如;20ML的處理量應(yīng)該用20ML的燒杯,。
如100ml大腸桿菌樣品設(shè)置參數(shù):超聲5秒/間隙5秒次數(shù)70次(總時(shí)間為10分鐘),。功率300W(僅供參考)500ML左右的量,功率開(kāi)到500W-800W左右
4,、若樣品放在1.5ml的EP管里請(qǐng)一定要將EP管固定好,,以防冰浴融化后液面下降導(dǎo)致空載
5、日常保養(yǎng):用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲,!
實(shí)驗(yàn)人員要注意儀器的維護(hù)以及保養(yǎng),,在操作過(guò)程中細(xì)心觀察,出現(xiàn)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素,,記錄并檢查,,以防止下次遇到同樣的事情。