高速逆流色譜儀具有的重現(xiàn)性

閱讀：1980發(fā)布時(shí)間：2017-6-20

高速逆流色譜儀具有的重現(xiàn)性

高速逆流色譜法 (High-speed Countercurrent Chromatography，簡稱HSCCC),，于1982年由美國國立衛(wèi)生院Ito博士研制開發(fā)的一種新型的、連續(xù)的液液分配色譜技術(shù),，與其它色譜技術(shù)不同的是它不需任何固態(tài)載體,，因此能避免固相載體表面與樣品發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致樣品的污染、失活,、變性和不可逆吸附等不良影響,。同時(shí)它也具有適用范圍廣、快速,、進(jìn)樣量大,、費(fèi)用低、回收率高等優(yōu)點(diǎn),。因此,，己在生物、醫(yī)藥,、食品,、材料、化妝品和環(huán)保等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用,，尤其是在天然產(chǎn)物活性成分的分離純化領(lǐng)域倍受重視,。

高速逆流色譜法是建立在單向性流體動(dòng)力平衡體系之上的一種逆流色譜分離方法，它是在研究旋轉(zhuǎn)管的流體動(dòng)力平衡時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)的。當(dāng)螺旋管在慢速轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí),，螺旋管中的兩相都從一端分布到另一端,。用某一相作移動(dòng)相從一端向另一端洗脫時(shí)，另一相在螺旋管里的保留值大約50%,，但這一保留量會(huì)隨著移動(dòng)相流速的增大而減小,，使分離效率降低。但使螺旋管的轉(zhuǎn)速加快時(shí),，兩相的分布發(fā)生變化,。當(dāng)轉(zhuǎn)速達(dá)到臨界范圍時(shí)，兩相就會(huì)沿螺旋管長度*分開,，其中一相全部占據(jù)首端的一段,，我們稱這一相為首端相，另一段全部占據(jù)尾端的一段,，稱為尾端相,。高速逆流色譜正是利用了兩相的這種單向性分布特征，在高的螺旋管轉(zhuǎn)動(dòng)速下,，如果從尾端送入首端相,，它將穿過尾端相而移向首端，同樣,，如果從首端相送入尾相,，它將穿過首端相而移向螺旋管的尾端。分離時(shí),，在螺旋管內(nèi)首先注入其中的一相(固定相),，然后從合適的一端泵入移動(dòng)相，讓它載著樣品在螺旋管中無限次的分配,。儀器轉(zhuǎn)速越快,，固定相保留越多，分離效果越好,，且大大地提高了分離速度,，故稱高速逆流色譜。

簡述高速逆流色譜儀的產(chǎn)品優(yōu)勢：

1,、由于溶劑系統(tǒng)的組成及配比可以是無限多的,，因而從理論上講可以適用于任何極性范圍內(nèi)樣品的分離，在分離天然化合物方面具有其獨(dú)到之處,。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體不需要固相載體,，因而可以消除固-液色譜中由于使用固相載體而帶來的吸附損失，特別適用于分離極性物質(zhì),。

2,、操作簡便，容易掌握：高速逆流色譜儀操作簡單，對(duì)樣品的預(yù)處理要求低,，一般的粗提物即可進(jìn)行的制備分離或分析,。

3、回收率高：不需要固相載體,，消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失,，理論上樣品的回收率可達(dá)。在實(shí)驗(yàn)中只要調(diào)整好分離條件,，一般都有很高的回收率,。

4、重現(xiàn)性好：如果樣品不具有較強(qiáng)的表面活性作用,，酸堿性也不強(qiáng),，即使多次進(jìn)樣，其分離過程都保持很穩(wěn)定,，而且重現(xiàn)性相當(dāng)好,。

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