制備色譜儀的相關介紹

閱讀：2742發(fā)布時間：2022-6-30

高速逆流色譜是一種連續(xù)高效的液—液分配色譜分離技術,，它不用任何固態(tài)的支撐物或載體。它利用兩相溶劑體系在高速旋轉的螺旋管內建立起一種**的單向性流體動力學平衡,，當其中一相作為固定相,，另一相作為流動相，在連續(xù)洗脫的過程中能保留大量固定相,。

由于不需要固體支撐體,，物質的分離依據(jù)其在兩相中分配系數(shù)的不同而實現(xiàn)，因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失,、失活,、變性等，不僅使樣品能夠全部回收,，回收的樣品更能反映其本來的特性,，適合于天然生物活性成分的分離。而且由于被分離物質與液態(tài)固定相之間能夠充分接觸,，使得樣品的制備量大大提高,，是一種理想的制備分離手段。

它相對于傳統(tǒng)的固—液柱色譜技術,，具有適用范圍廣,、操作靈活、高效,、快速,、制備量大、費用低等優(yōu)點,。HSCCC 技術正在發(fā)展成為一種備受關注的新型分離純化技術,，已經(jīng)廣泛應用于生物醫(yī)藥、天然產物,、食品和化妝品等領域,，在天然產物行業(yè)中已被認為是一種有效的分離技術；適合于中小分子類物質的分離純化,。

制備色譜儀比較常用的是制備薄層板色譜,、制備離心薄層色譜、制備干柱薄層色譜三個類別,。

1,、制備薄層板色譜

制備板：一般使用200X200mm的薄層色譜板,，吸附劑厚度為0.5~1mm，一般不超過2m,，平均1mm厚需要的硅膠量為15~20g,。為了得到低成本、鋪層均勻的高質量制備薄層板,，建議使用上?？普芄镜腡D-II型全自動制備薄層鋪板機。

點樣：制備薄層分離的樣品量大,，一般采用條帶點樣,、不使用圓點點樣；一般1mm厚的硅膠*大約100mg,，樣品濃度不宜太稀，應在2~10%為宜,。為了得到均勻而規(guī)則的點樣結果,，建議使用上海科哲公司的SP-3型電動薄層條帶點樣器,。同時展開劑的用量比較大,，點樣位置要比較高

展開：薄層色譜層析缸要充分飽和，如制備板數(shù)量較多,，請選用上?？普芄镜闹苽浔影寮埽?/span>

顯色：一般使用紫外燈或碘蒸汽等非破壞方式顯色,，或在板邊緣進行化學試劑顯色,；

回收：將檢測到的樣品連同硅膠一齊刮下，防入砂芯漏斗,，使用適當溶劑將組分洗脫,，將洗脫溶劑蒸干即可。一般希望洗脫溶劑沸點較低,，不與組分發(fā)生反應,。

制備薄層板色譜優(yōu)點是使用方便、便宜,、節(jié)省人力,，缺點是分離時間較長。

2,、制備離心薄層色譜

與普通制備板有三個不同點：

首先：色譜板是圓的,，是徑向色譜，分離能力優(yōu)于方板,；

其次：洗脫液的流動不靠毛細現(xiàn)象,，靠離心力,，減少了分離時間與脫尾，分離效能很高,；

后：洗脫液是連續(xù)流動的,，可以非常容易的形成梯度，并且不需要刮下吸附層,，這樣可以使色譜板可以反復使用,；

所以，制備離心薄層色譜的分離效能與分離速度要遠高于制備薄層板色譜,，建議采用上海公司科哲公司的KH-CTLC型制備離心薄層色譜儀,。

3、制備干柱薄層色譜

可以看作棒狀的薄層色譜,，優(yōu)點是簡單易行,，快速經(jīng)濟、制備量大,。缺點是必須使用可透紫外的管材,，而且在收集樣品時要割斷管材，使費用略高,。上?？普芄咎峁Ｓ玫谋由V柱。本方法與真空系統(tǒng)聯(lián)用,，構成減壓真空色譜,，性能會得到進一步提升。

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