高速逆流色譜法的技術(shù)特點(diǎn)

閱讀：2195發(fā)布時間：2018-5-21

高速逆流色譜法 (High-speed Countercurrent Chromatography,，簡稱HSCCC)，于1982年由美國國立衛(wèi)生院Ito博士研制開發(fā)的一種新型的,、連續(xù)的液液分配色譜技術(shù),，與其它色譜技術(shù)不同的是它不需任何固態(tài)載體，因此能避免固相載體表面與樣品發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致樣品的污染,、失活,、變性和不可逆吸附等不良影響。同時它也具有適用范圍廣,、快速,、進(jìn)樣量大、費(fèi)用低,、回收率高等優(yōu)點(diǎn),。因此，己在生物,、醫(yī)藥,、食品、材料,、化妝品和環(huán)保等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用,，尤其是在天然產(chǎn)物活性成分的分離純化領(lǐng)域倍受重視。

1．應(yīng)用范圍廣,，適應(yīng)性好

由于溶劑系統(tǒng)的組成及配比可以是無限多的,，因而從理論上講可以適用于任何極性范圍內(nèi)樣品的分離,，在分離天然化合物方面具有其獨(dú)到之處。由于聚四氟乙烯管中的固定相為液體不需要固相載體,，因而可以消除固-液色譜中由于使用固相載體而帶來的吸附損失,，特別適用于分離極性物質(zhì)。

2．回收率高

不需要固相載體,，消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失,，理論上樣品的回收率可達(dá)。在實(shí)驗(yàn)中只要調(diào)整好分離條件,，一般都有很高的回收率,。

3．操作簡便，容易掌握

儀器操作簡單,，對樣品的預(yù)處理要求低,，一般的粗提物即可進(jìn)行的制備分離或分析。

4．重現(xiàn)性好

如果樣品不具有較強(qiáng)的表面活性作用,，酸堿性也不強(qiáng),，即使多次進(jìn)樣，其分離過程都保持很穩(wěn)定,，而且重現(xiàn)性相當(dāng)好,。

5．分離效率高，分離量較大

由于其與一般的色譜分離方式不同,，能實(shí)現(xiàn)梯度洗脫和反相洗脫,，亦能進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣，使其特別適用于制備性分離,，產(chǎn)品純度高,，制備量大。

6．分配系數(shù)

溶劑系統(tǒng)的選擇是同時選擇色譜分離過程的兩相,，是對樣品成功分離的關(guān)鍵所在，而樣品中各組分的分配系數(shù)決定著這種溶劑系統(tǒng)是否合適,，因此分配系數(shù)的測定是選擇溶劑系統(tǒng)的重要環(huán)節(jié),。目前，分配系數(shù)的測定多采用薄層色譜法,、毛細(xì)管電泳法,、HPLC法、生物活性分配比率法及分析型HSCCC法,。

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